"МУК 4.1.4021-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций эпоксиконазола в воздухе рабочей зоны методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания по методам контроля"
(утв. Роспотребнадзором 31.05.2024)

1. Разработаны ФБУН "ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (Кузьмин С.В., Синицкая Т.А., Горячева Л.В., Егорченкова О.Е., Гордиюк А.В.).

2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой "31" мая 2024 г.

3. Введены впервые.

1.1. Настоящие методические указания по методам контроля (далее - МУК) описывают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии (далее - ГЖХ) для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации эпоксиконазола в диапазоне: 0,02 - 0,20 мг/м³ - без учета разбавления и 0,02 - 10,00 мг/м³ - с учетом разбавления в 50 раз.

1.2. МУК носят рекомендательный характер.

2.1. Эпоксиконазол - (2RS,3SR)-1-[3-(2-хлорфенил)-2,3-эпокси-2-(4-фторфенил)пропил]-1H-1,2,4-триазол <1>. Класс триазолов. Брутто-формула C₁₇H₁₃ClFN₃O. Молекулярная масса 329,8.

--------------------------------

<1> В соответствии с классификацией Международного союза теоретической и прикладной химии (ИЮПАК) (англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

2.2. Физические и химические свойства.

Бесцветное кристаллическое вещество. Температура плавления плюс 136 °C. Давление паров при температуре плюс 20 °C: менее 0,01 мПа. Плотность при температуре плюс 22 °C: 1,384 г/см³. Коэффициент распределения н-октанол-вода K_owlogP = 3,44 (pH 7). Растворимость в воде при температуре плюс 20 °C: 6,63 x 10^-3 г/дм³. Растворимость в органических растворителях: ацетон - 144 г/дм³; дихлорметан - 291 г/дм³; гептан - 0,4 г/дм³. Гидролитическая стабильность: стабилен при pH 5; 12 дней при pH 7.

2.3. Краткая токсикологическая характеристика.

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс более 5000 мг/кг, острая дермальная токсичность (LD₅₀) для крыс более 2000 мг/кг, острая ингаляционная токсичность (LC₅₀) 4 ч для крыс более 5,3 мг/дм³ воздуха.

2.4. Область применения.

Эпоксиконазол применяется в качестве системного фунгицида в сельском хозяйстве в посевах зерновых колосовых культур при однократной наземной обработке посевов в период вегетации.

3.1. При соблюдении условий проведения анализа и методики, изложенной в настоящих МУК погрешность <2> результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.

--------------------------------

<2> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения", введенный в действие постановлением Госстандарта Российской Федерации от 23.04.2002 N 161-ст (далее - ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002).

4.1. Измерения концентраций эпоксиконазола выполняют методом ГЖХ с электронозахватным детектором (далее - ЭЗД).

4.2. Концентрирование вещества из воздуха рабочей зоны осуществляют при помощи бумажных фильтров высокой плотности, экстракцию проводят смесью гексан-ацетон (9:1, по объему).

4.3. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,1 нг. Средняя полнота извлечения - 89,8%.

5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы, приведенные в таблицах 5.1 - 5.3.

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2017, а также требования, изложенные в технической документации на газовые хроматографы.

6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009-83. Организуется обучение работников безопасности труда.

6.3. Работа с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см²), осуществляется в соответствии с законодательством Российской Федерации <3>.

--------------------------------

<3> Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением, утвержденные приказом Федеральной службы по экологическому, технологическому и атомному надзору от 15.12.2020 N 536 (зарегистрировано Минюстом России 31.12.2020, регистрационный N 61998).

Запрещается открывать вентиль баллона, не установив в нем понижающий редуктор.

6.4. Измерения в соответствии с настоящими МУК может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

7.1. При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс 15 - 30 °C и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией на приборы.

8.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление смеси растворителей для экстракции бумажных фильтров, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров для отбора проб воздуха, отбор проб.

8.2. Очистка органических растворителей.

8.2.1. Очистка н-гексана. н-Гексан последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

8.2.2. Очистка ацетона. Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ растворителя около 10 г перманганата калия и 30 г карбоната калия) или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30. Хранят при комнатной температуре не более 1 месяца.

8.3. Приготовление смеси гексан-ацетон для экстракции бумажных фильтров.

Смесь гексан-ацетон (9:1, по объему). В мерную колбу вместимостью 500 см³ помещают 50 см³ ацетона, доводят гексаном до метки, тщательно перемешивают. Хранят не более 14 дней.

8.4. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения.

8.4.1. Исходный раствор эпоксиконазола для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают (0,0100 +/- 0,0005) г эпоксиконазола, растворяют в 50 - 60 см³ ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно перемешивают.

Раствор готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более 3 месяцев.

8.4.2. Раствор N 1 эпоксиконазола для градуировки и внесения (концентрация 10,0 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10,0 см³ исходного раствора с концентрацией эпоксиконазола 100 мкг/см³ (п. 8.4.1), разбавляют гексаном до метки.

Раствор N 1 готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более месяца.

Раствор N 1 используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено" и контроля качества результатов измерений методом добавок.

Растворы N 2 - 6 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

8.4.3. Рабочие растворы N 2 - 6 эпоксиконазола для градуировки (концентрации 0,1 - 1,0 мкг/см³). В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 1,0; 2,0; 5,0; 8,0 и 10,0 см³ градуировочного раствора N 1 с концентрацией 10,0 мкг/см³ (см. п. 8.4.2), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 6 с концентрацией эпоксиконазола 0,1; 0,2; 0,5; 0,8 и 1,0 мкг/см³, соответственно.

Рабочие растворы N 2 - 6 готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более 10 дней.

8.5. Установление градуировочной характеристики.

Градуировочную характеристику, выражающую линейную зависимость площади пика от концентрации эпоксиконазола в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки.

В испаритель хроматографа вводят по 1 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.2. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площади пика эпоксиконазола, на основании которых строят градуировочную зависимость.

8.6. Контроль стабильности градуировочной характеристики.

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов. При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов градуировочных растворов, содержание эпоксиконазола в которых должно входить в линейный диапазон концентраций от 0,1 до 1,0 мкг/см³.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение (1), (2):

где: A - величина расхождения, %;

X - концентрация эпоксиконазола в пробе при контрольном измерении, мкг/см³;

C - известная концентрация градуировочного раствора эпоксиконазола, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см³;

B - норматив контроля стабильности градуировочной характеристики, % (равен 10% при P = 0,95).

Если величина расхождения (A) превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов эпоксиконазола, предусмотренных настоящими МУК. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново в соответствии с п. 8.4.

8.7. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха рабочей зоны.

Диаметр бумажного фильтра высокой плотности должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя. Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем смесью гексан-ацетон (9:1, по объему) порциями по 25 - 30 см³, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой таре.

9.1. Отбор проб осуществляется в соответствии с методическими документами <4>.

--------------------------------

<4> Глава 2 приложения 9 Р 2.2.2006-05 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда", утвержденного руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 29.06.2005; ГОСТ 12.1.005-88 "Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны", введенный постановлением Госстандарта СССР от 29.09.1988 N 3388.

9.2. Воздух с объемным расходом 2,0 - 5,0 дм³/мин аспирируют через бумажные фильтры высокой плотности. Для измерения концентрации эпоксиконазола на уровне предела обнаружения (0,02 мг/м³) необходимо отобрать 10 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более 7 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру и хранят при температуре не выше минус 18 °C.

10.1. Экстракцию эпоксиконазола с бумажных фильтров проводят следующим образом: экспонированные фильтры переносят в химический стакан вместимостью 150 см³, заливают 15 см³ смесью гексан-ацетон (9:1, по объему), помещают на встряхиватель на 10 мин. Растворитель декантируют в круглодонную колбу вместимостью 100 см³, фильтр еще дважды промывают новыми порциями смесью гексан-ацетон (9:1, по объему) объемом 10 см³, выдерживая на встряхивателе по 10 мин.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу вместимостью 100 см³, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше плюс 35 °C досуха.

Сухой остаток растворяют в 2 см³ гексана, тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 10.2.

10.2. Условия хроматографирования.

10.2.1. Газовый хроматограф, оснащенный ЭЗД.

Хроматографическая, капиллярная, кварцевая колонка, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент 5% фенил- и 95% диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,25 мкм).

Температура детектора: плюс 300 °C.

Температура испарителя: плюс 280 °C.

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - плюс 140 °C, нагрев колонки со скоростью 15 °C/мин до температуры плюс 270 °C, выдержка 2 мин, нагрев колонки со скоростью 10 °C/мин до температуры плюс 280 °C.

Газ 1 (азот):

- давление 140 кПа;

- поток в колонке 1,0 см³/мин;

- деление потока 1:2,7.

Хроматографируемый объем: 1 мм³.

Линейный диапазон детектирования: 0,1 - 1,0 нг.

Ориентировочное время удерживания эпоксиконазола: 8,637 мин.

10.2.2 Газовый хроматограф, оснащенный масс-селективным детектором (метод подтверждения).

Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент 5% фенил- и 95% диметилполисилоксана, толщина пленки сорбента 0,25 мкм.

Температура детектора: источника ионов плюс 200 °C, переходной линии плюс 250 °C.

Температура испарителя: плюс 270 °C.

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура плюс 140 °C, выдержка 1 мин, нагрев колонки со скоростью 15 °C/мин до температуры плюс 270 °C, выдержка 2 мин, нагрев колонки со скоростью 10 °C/мин до температуры плюс 280 °C.

Газ 1 (гелий):

- поток в колонке 1,0 см³/мин;

- давление - 90,813 кПа;

- без деления потока;

- средняя линейная скорость - 37,652 см/сек.

- хроматографируемый объем: 2 мм³

- режим сканирования - мониторинг выбранных ионов (SIM): отношение масса-заряд: 165 (количественный), 192, 206.

- линейный диапазон детектирования: 0,2 - 2,0 нг.

- ориентировочное время удерживания эпоксиконазола 10,427 мин.

11.1 Концентрацию эпоксиконазола в пробе воздуха (X), мг/м³, рассчитывают по формуле (3):

где: C - концентрация эпоксиконазола в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площадей хроматографического пика, мкг/см³;

Кр - кратность разбавления (если экстракт подвергался разбавлению);

W - объем раствора, подготовленного для хроматографирования, см³;

V_t - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 101,3 кПа, температура плюс 20 °C), дм³, который определяется по формуле (4):

где: T - температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), °C;

P - атмосферное давление при отборе пробы, кПа;

u - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин;

t - длительность отбора пробы, мин;

R - коэффициент, равный 2,892 для воздуха рабочей зоны.

Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

12.1. Результат количественного анализа представляют в виде формулы (5):

где: X - среднее арифметическое результатов определений, мг/м³;

- граница абсолютной погрешности, мг/м³, рассчитанная по формуле (6):

где: - граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, таблица 3.1), %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "содержание эпоксиконазола в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,02 мг/м³" <5>.

--------------------------------

<5> Примечание: 0,02 мг/м³ - предел обнаружения эпоксиконазола при отборе 10 дм³ воздуха рабочей зоны.

13.1. Контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с методическими документами <6>.

--------------------------------

<6> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002; ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст.

Периодичность и формы контроля определяется системой менеджмента качества лаборатории.

13.2. Показатели повторяемости и воспроизводимости, пределы повторяемости и воспроизводимости при P = 0,95 приведены в таблице 13.1.

1. Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".

2. Постановление Правительства Российской Федерации от 16.11.2020 N 1847 "Об утверждении перечня измерений, относящихся к сфере государственного регулирования обеспечения единства измерений".

3. Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением.

4. Р 2.2.2006-05 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда".

5. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения".

6. ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений".

7. ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений".

8. ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений".

9. ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений".

10. ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике".

11. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

12. ГОСТ 1770-74 "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".

13. ГОСТ 29227-91 "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".

14. ГОСТ OIML R 111-1-2009 "Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования".

15. ГОСТ 4204-77 "Кислота серная. Технические условия".

16. ГОСТ 2603-79 "Ацетон. Технические условия".

17. ГОСТ 20490-75 "Калий марганцовокислый. Технические условия".

18. ГОСТ 4221-76 "Калий углекислый. Технические условия".

19. ГОСТ 5962-2013 "Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия".

20. ГОСТ 9293-74 "Азот газообразный и жидкий. Технические условия".

21. ГОСТ 9147-80 "Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия".

22. ГОСТ 12026-76 "Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия".

23. ГОСТ Р 51945-2002 "Аспираторы. Общие технические условия".

24. ГОСТ 25336-82 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".

25. ГОСТ 26678-85 "Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия".

26. ГОСТ 12.1.007-76 "Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

27. ГОСТ 12.1.019-2017 "Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

28. ГОСТ 12.1.004-91 "Пожарная безопасность. Общие требования".

29. ГОСТ 12.4.009-83 "Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".

30. ГОСТ 12.1.005-88 "Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".