"МУК 4.1.4032-24. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций сульфентразона в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе городских и сельских поселений методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания по методам контроля"
(утв. Роспотребнадзором 31.05.2024)

1. Разработаны ФБУН "ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (Кузьмин С.В., Синицкая Т.А., Федорова Н.Е., Горячева Л.В., Степанова Н.А.)

2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой "31" мая 2024 г.

3. Введены впервые.

1.1. Настоящие методические указания по методам контроля (далее - МУК) описывают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для определения в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе городских и сельских поселений массовой концентрации сульфентразона в диапазонах: в воздухе рабочей зоны 0,1 - 1,0 мг/м³ - без учета разбавления, 0,1 - 50 мг/м³ - с учетом разбавления в 50 раз, в атмосферном воздухе 0,004 - 0,04 мг/м³ - без учета разбавления, 0,004 - 2,0 мг/м³ - с учетом разбавления в 50 раз.

1.2. МУК носят рекомендательный характер.

2.1. Сульфентразон - N-{2,4-Дихлор-5-[4-(дифторметил)-3-метил-5-оксо-4,5-дигидро-1H-1,2,4-триазол-1-ил]фенил} метансульфонамид <1>.

--------------------------------

<1> В соответствии с классификацией Международного союза теоретической и прикладной химии (ИЮПАК) (англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

2.2. Физические и химические свойства.

Светлый порошок со слабым нехарактерным запахом. Температура плавления плюс 122 °C. Давление паров 1,3·10^-4 мПа (при температуре плюс 20 °C). Растворимость в воде при температуре плюс 20 °C - 780 мг/дм³. Растворимость в органических растворителях (при температуре плюс 20 °C, г/дм³): ацетон - 640, ацетонитрил - 186, толуол - 66,6, гексан - 0,11. Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода: K_OW logP - 0,991 (при температуре плюс 20 °C).

2.3. Краткая токсикологическая характеристика.

Острая пероральная токсичность для крыс (ЛД₅₀) - 2855 мг/кг, острая дермальная токсичность для крыс (ЛД₅₀) - 2000 мг/кг. Острая ингаляционная токсичность (ЛК₅₀) для крыс более 4,13 мг/дм³ (динамическая экспозиция).

2.4. Область применения.

Сульфентразон относится к классу триазолов, борется с сорняками, разрушая мембраны и ингибируя фотосинтез в растениях.

3.1. При соблюдении условий проведения анализа и методики, изложенной в настоящих МУК, погрешность <2> результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.

--------------------------------

<2> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения", введенный в действие постановлением Госстандарта Российской Федерации от 23.04.2002 N 161-ст (далее - ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002).

4.1. Измерения концентраций сульфентразона выполняют методом ВЭЖХ на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

4.2. Концентрирование вещества из воздуха осуществляют на фильтры "синяя лента", экстракцию проводят ацетоном.

4.3. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы воздуха рабочей зоны и атмосферного воздуха - 2 нг.

5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы, приведенные в таблицах 5.1 - 5.3.

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2017, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостные хроматографы.

6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009-83. Организуется обучение работников безопасности труда.

6.3. Измерения в соответствии с настоящими МУК может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

7.1. При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс 15 - 30 °C и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией на приборы.

8.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетона и ацетонитрила (при необходимости), подготовка раствора ортофосфорной кислоты, подготовка подвижной фазы для кондиционирования хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров для отбора проб воздуха, отбор проб.

8.2. Очистка ацетонитрила. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия). Хранят при комнатной температуре не более 2 недель.

8.3. Очистка ацетона. Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ растворителя около 10 г перманганата калия и 30 г карбоната калия) или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30. Хранят при комнатной температуре в таре из темного стекла в темноте не более 1 месяца.

8.4. Приготовление 0,1% водного раствора ортофосфорной кислоты (компонент А подвижной фазы). В мерную колбу вместимостью 1000 см³ добавляют 600 см³ деионизованной воды, пипеткой на 1 см³ вносят 1,0 см³ концентрированной ортофосфорной кислоты и доводят водой до метки, тщательно перемешивают. Раствор готовят при температуре плюс 20 °C и хранят не более 14 дней.

8.5. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ (для кондиционирования колонки и разбавления рабочих градуировочных растворов). В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 600 см³ 0,1% раствора ортофосфорной кислоты воды, добавляют 400 см³ ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют. Раствор готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

8.6. Кондиционирование хроматографической колонки. Промывают колонку подвижной фазой (п. 8.5) при скорости подачи растворителя 1,0 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

8.7. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения.

8.7.1. Исходный раствор сульфентразона для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают (0,0100 +/- 0,0005) г сульфентразона, растворяют в 50 - 60 см³ ацетонитрила, при необходимости выдерживают в ультразвуковой бане до полного растворения вещества, доводят до метки ацетонитрилом, перемешивают. Раствор готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более трех месяцев.

Растворы N 1 - 6 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

8.7.2. Раствор N 1 сульфентразона для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора сульфентразона с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 8.7.1), разбавляют ацетонитрилом до метки. Градуировочный раствор N 1 готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более трех месяцев.

8.7.3. Рабочие растворы N 2 - 6 сульфентразона для градуировки (концентрация 0,07 - 1,2 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 0,07; 1,0; 5,0; 10,0 см³ раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 8.7.2), доводят до метки подвижной фазой (см. п. 8.5), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией сульфентразона 0,07; 0,1; 0,5; 1,0 мкг/см³ соответственно. В мерную колбу вместимостью 50 см³ помещают 6,0 см³ раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 8.7.2), доводят до метки подвижной фазой (см. п. 8.5), тщательно перемешивают, получают рабочий раствор N 6 с концентрацией сульфентразона 1,2 мкг/см³. Рабочие растворы N 2 - 6 готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более недели.

8.8. Установление градуировочной характеристики. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (единицы оптической плотности) от концентрации сульфентразона в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки N 2 - 6.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования (см. п. 10.2). Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площадь пика сульфентразона.

8.9. Контроль стабильности градуировочной характеристики. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов растворов для градуировки, содержание сульфентразона в которых должно входить в диапазон концентраций от 0,07 до 1,2 мкг/см³.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемых для контроля градуировочных растворов сохраняется соотношение (1), (2):

где: A - величина расхождения, %;

X - концентрация сульфентразона в растворе при контрольном измерении, мкг/см³;

C - известная концентрация градуировочного раствора, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см³;

B - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 10% при P = 0,95).

Если величина расхождения (A) превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов сульфентразона, предусмотренных настоящими МУК. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново в соответствии с п. 8.7.

8.8. Подготовка фильтров для отбора проб воздушной среды.

Диаметр бумажного фильтра высокой плотности должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя: для воздуха рабочей зоны 50 мм, для атмосферного воздуха 70 мм. Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетонитрилом порциями по 25 - 30 см³, сушат с помощью разрежения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой таре.

9.1. Отбор проб осуществляется в соответствии с методическими документами <3>.

--------------------------------

<3> Глава 2 приложения 9 Р 2.2.2006-05 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда", утвержденного руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 29.06.2005; ГОСТ 12.1.005-88 "Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны", утвержденный постановлением Госстандарта СССР от 29.09.1988 N 3388.

9.1.1. Воздух рабочей зоны. Воздух с объемным расходом 2,0 дм³/мин аспирируют через фильтры "синяя лента". Для измерения концентрации сульфентразона на уровне предела обнаружения (0,1 мг/м³) для воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 2 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C - 5 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру и хранят при температуре не выше минус 18 °C.

9.1.2. Атмосферный воздух. Воздух с объемным расходом 5,0 дм³/мин аспирируют через фильтры "синяя лента". Для измерения концентрации сульфентразона на уровне предела обнаружения (0,004 мг/м³) для атмосферного воздуха необходимо отобрать 50 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C - 5 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру и хранят при температуре не выше минус 18 °C.

10.1. Воздух рабочей зоны и атмосферный воздух. Вещество с фильтров "синяя лента" экстрагируют следующим образом: фильтр переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, заливают 10 см³ ацетона, помещают на встряхиватель на 10 мин. Растворитель декантируют (через воронку) в круглодонную колбу вместимостью 100 см³, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 см³, выдерживая на встряхивателе по 5 мин.

Объединенный экстракт, помещенный в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше плюс 35 °C досуха.

Сухой остаток растворяют в 2 см³ подвижной фазы (см. п. 8.3), тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 10.2.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию сульфентразона в хроматографируемом растворе.

10.2. Условия хроматографирования.

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором.

Хроматографическая колонка стальная длиной 150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая сорбент C18, зернением 5 мкм.

Температура колонки: плюс 25 °C.

Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,1%-ортофосфорная кислота (40:60, по объему).

Скорость потока элюента: 1,0 см³/мин.

Рабочая длина волны: 230 нм.

Объем вводимой пробы: 20 мм³.

Ориентировочное время выхода сульфентразона: 7,0 - 7,2 мин.

Линейный диапазон детектирования: 0,2 - 2 нг.

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор сульфентразона с концентрацией 1,2 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).

11.1. Воздушная среда. Концентрацию сульфентразона в пробе воздуха (X), мг/м³, рассчитывают по формуле (3) <4>:

где: C - концентрация сульфентразона в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площадей хроматографического пика, мкг/см³;

Кр - кратность разбавления (если экстракт подвергался разбавлению);

W - объем раствора, подготовленного для хроматографирования, см³;

V_t - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к нормальным условиям (давление 101,3 кПа, температура 0 °C - для атмосферного воздуха и плюс 20 °C - для воздуха рабочей зоны), дм³, рассчитанный по формуле (4):

где: T - температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), °C;

P - атмосферное давление при отборе проб, кПа;

u - расход воздуха при отборе проб, дм³/мин;

t - длительность отбора проб, мин;

R - коэффициент, равный 2,892 для воздуха рабочей зоны и 2,694 для атмосферного воздуха.

--------------------------------

12.1. Результат количественного анализа представляют в виде формулы (6):

где: X - результат определения, мг/м³, мкг/смыв;

- граница абсолютной погрешности, мг/м³, рассчитанная по формуле (7):

где: - граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, таблица 3.1), %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "содержание сульфентразона в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,1 мг/м³; в пробе атмосферного воздуха - менее 0,004 мг/м" <5>.

--------------------------------

<5> Примечание: 0,1 мг/м³; 0,004 мг/м³ - пределы обнаружения сульфентразона при отборе 2 дм³ воздуха рабочей зоны; 50 дм³ атмосферного воздуха.

13.1. Контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с методическими документами <6>.

--------------------------------

<6> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002; ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике", введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 N 161-ст.

Периодичность и формы контроля определяются руководством по качеству.

13.2. Показатели повторяемости и воспроизводимости, пределы повторяемости и воспроизводимости при P = 0,95 приведены в таблице 13.1.

1. Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".

2. Постановление Правительства Российской Федерации от 16.11.2020 N 1847 "Об утверждении перечня измерений, относящихся к сфере государственного регулирования обеспечения единства измерений".

3. Р 2.2.2006-05 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда".

4. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения".

5. ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений".

6. ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений".

7. ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений".

8. ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений".

9. ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике".

10. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

11. ГОСТ 29227-91 "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".

12. ГОСТ 1770-74 "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".

13. ГОСТ OIML R 111-1-2009 "Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования".

14. ГОСТ Р 51945-2002 "Аспираторы. Общие технические условия".

15. ГОСТ Р 52501-2005 "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".

16. ГОСТ 20490-75 "Калий марганцовокислый. Технические условия".

17. ГОСТ 2603-79 "Ацетон. Технические условия".

18. ГОСТ 4221-76 "Калий углекислый. Технические условия".

19. ГОСТ 25336-82 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".

20. ГОСТ 83-79 "Натрий углекислый. Технические условия".

21. ГОСТ 12026-76 "Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия".

22. ГОСТ 9147-80 "Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия".

23. ГОСТ 26678-85 "Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия".

24. ГОСТ 12.1.007-76 "Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

25. ГОСТ 12.1.019-2017 "Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

26. ГОСТ 12.1.004-91 "Пожарная безопасность. Общие требования".

27. ГОСТ 12.4.009-83 "Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".

28. ГОСТ 12.1.005-88 "Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".