"МУК 4.1.3762-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций диметиламина в воде методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 26.05.2022)

1. Разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (С.В. Кузьмин. В.Н. Ракитский, Н.Е. Федорова, А.А. Ивченкова, Л.В. Горячева).

2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 26 мая 2022 г.

3. МУК 4.1.3762-22 введены взамен МУК 4.1.1674-03 "Измерение концентраций диметиламина в воде газохроматографическим методом", утвержденных Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации 30.06.2003.

1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для определения в воде питьевой систем централизованного, в том числе горячего, и нецентрализованного водоснабжения, в воде подземных и поверхностных водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования, в воде плавательных бассейнов и аквапарков массовой концентрации диметиламина в диапазоне 0,005 - 0,1 мг/дм³.

1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы организациями, осуществляющими контроль безопасности и исследования объектов окружающей среды.

1.3. МУК носят рекомендательный характер.

2.1. Диметиламин - N-метилметанамин <1>. Брутто-формула C₂H₇N. Молекулярная масса 45,09 г/моль.

--------------------------------

<1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

2.2. Физические и химические свойства. Бесцветный горючий газ с резким запахом. Температура кипения плюс 6,9 °C. Хорошо растворим в воде, спирте и в органических растворителях. Встречается в природе как продукт гниения белковых веществ.

2.3. Диметиламин относится к веществам II класса опасности. При ингаляционном пути поступления в организм диметиламин является высокотоксичным веществом. При попадании на кожу диметиламин вызывает некроз.

3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.

4.1. Измерения концентраций диметиламина выполняют методом ВЭЖХ на обращенной фазе с флуориметрическим детектором.

4.2. Образцы воды очищают фильтрованием через мембранные шприцевые фильтры, а затем дериватизируют с использованием 0,01 М раствора 9-флуоренилметилхлороформиата (9-Fluorenylmethylchloroformate, далее - FMOC) в среде боратного буфера с последующей очисткой гексаном.

4.3. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,1 нг.

5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в табл. 5.1 - 5.3.

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

Примечание. Допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостные хроматографы.

6.2. Все работы с диметиламином проводят в вытяжном шкафу, при включенной вентиляции в спецодежде (халат, защитные очки, резиновые перчатки).

6.3. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

6.4. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

7.1. При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (15 - 30) °C и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией на приборы.

8.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), подготовка подвижной фазы, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки, внесения и дериватизации, проведение дериватизации, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

8.2. Очистка органических растворителей.

8.2.1. Очистка ацетонитрила. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют. Непосредственно перед применением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия).

8.2.2. Очистка гексана. Гексан последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты (на 1 дм³ гексана объем порции кислоты 20 - 25 см³) до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод (на 1 дм³ гексана объем порции воды 50 - 60 см³); после чего перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ гексана 10 г карбоната калия).

8.3. Приготовление 0,025 М раствора тетрабората натрия. В мерную колбу на 100 см³ вносят 0,953 г тетрабората натрия, растворяют в 50 см³ воды, доводят до метки деионизированной водой, тщательно перемешивают. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

8.4. Приготовление 0,01 М раствора FMOC. В мерную колбу на 100 см³ вносят 0,259 г FMOC, растворяют в 50 см³ ацетонитрила, доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 30 дней.

8.5. Приготовление 0,2%-го раствора уксусной кислоты. Для приготовления 0,2%-го раствора уксусной кислоты в мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают ~ 600 дм³ дистиллированной воды, затем вносят 2,0 см³ ледяной уксусной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

8.6. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ. В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 450 см³ 0,2%-го раствора уксусной кислоты, добавляют 550 см³ ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

8.7. Кондиционирование хроматографической колонки. Промывают колонку подвижной фазой (п. 8.6) при скорости подачи растворителя 0,8 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

8.8. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения.

8.8.1. Исходный раствор диметиламина для градуировки (концентрация 10 мкг/см³). Из ампулы, содержащей стандартный образец водного раствора диметиламина, отбирают пипеткой 1,0 см³ (концентрация 1 мг/см³) и помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³. Доводят водой до метки, перемешивают. Раствор хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более одной недели.

Растворы N 1 - 6 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

8.8.2. Раствор N 1 диметиламина для градуировки и внесения (концентрация 1 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора диметиламина с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 8.8.1), разбавляют водой до метки, перемешивают.

Градуировочный раствор N 1 хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более одной недели.

8.8.3. Рабочие растворы N 2 - 6 диметиламина для градуировки (концентрация 0,005 - 0,1 мкг/см³). В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см³ раствора N 1 с концентрацией 1 мкг/см³ (п. 8.8.2), доводят до метки водой, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 6 с концентрацией диметиламина 0,005; 0,01; 0,02; 0,05 и 0,1 мкг/см³, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более одной недели.

8.8.4. Рабочие растворы N 2а - 6а производных диметиламина для градуировки (концентрация 0,005 - 0,1 мкг/см³). Операцию дериватизации проводят в стеклянных пробирках на 5 см³ с притертой пробкой. В 5 пробирок помещают по 0,4 см³ каждого из пяти рабочих растворов диметиламина N 2 - 6 (п. 8.8.3), прибавляют по 0,5 см³ 0,01 М раствора FMOC (п. 8.4) и по 0,5 см³ 0,025 М раствора тетрабората натрия (п. 8.3). Помещают пробирки на 10 минут на аппарат для встряхивания. Затем добавляют в каждую пробирку по 5 мм³ ледяной уксусной кислоты, интенсивно встряхивают. Добавляют по 2 см³ гексана, помещают на аппарат для встряхивания на 3 минуты. После расслоения фаз верхний слой гексана удаляют пипеткой. Для анализа берут нижний слой. Получают рабочие растворы производных диметиламина N 2а - 6а с концентрациями 0,005, 0,01, 0,02, 0,05 и 0,1 мкг/см³, соответственно.

Дериватизированные градуировочные растворы хранятся в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более 5 дней.

8.9. Установление градуировочной характеристики. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (ед. люминесценции·сек) от концентрации диметиламина в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки N 2а - 6а.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.3. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площадь пика диметиламина.

8.10. Контроль стабильности градуировочной характеристики. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов растворов для градуировки, содержание диметиламина в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,005 до 0,1 мкг/см³.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

X - концентрация вещества в растворе при контрольном измерении, мкг/см³;

C - известная концентрация градуировочного раствора, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см³;

B - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 10% при P = 0,95).

Если величина расхождения (A) превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов диметиламина, предусмотренных методикой измерения. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 8.9.

9.1. Отбор проб осуществляют в соответствии с документом <2>.

--------------------------------

<2> ГОСТ Р 31861 "Вода. Общие требования к отбору проб".

Воду отбирают в полимерные или стеклянные бутылки емкостью 0,5 см³.

Отобранные пробы хранят и транспортируют при температуре не более 10 °C.

В лаборатории пробы хранят в холодильнике при температуре плюс (2 - 6) °C не более 3 дней.

10.1. Тщательно перемешивают пробу воды. Необходимый объем (не менее 10 см³) воды пропускают через шприцевой фильтр с размером пор 0,45 мкм.

10.2. Дериватизация пробы. Операцию проводят в стеклянных пробирках на 5 см³ с притертой пробкой. В пробирку помещают 0,4 см³ пробы воды, отфильтрованной по п. 10.1. Прибавляют 0,5 см³ 0,01 М раствора FMOC (п. 8.4) и 0,5 см³ 0,025 М раствора тетрабората натрия (п. 8.3). Помещают пробирку на 10 минут на аппарат для встряхивания (вортекс). Затем добавляют 5 мм³ ледяной уксусной кислоты, интенсивно встряхивают. Добавляют 2 см³ гексана, помещают на аппарат для встряхивания (вортекс) на 3 минуты. После расслоения фаз верхний слой гексана удаляют пипеткой. Для анализа берут нижний слой. Анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 10.3.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию диметиламина в хроматографируемом растворе.

10.3. Условия хроматографирования.

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

- жидкостной хроматограф с флуориметрическим детектором;

- колонка стальная длиной 150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая сорбент C18, зернением 5 мкм;

- температура колонки плюс 25 °C;

- подвижная фаза: ацетонитрил - 0,2%-я уксусная кислота (55 : 45, по объему);

- скорость потока элюента 0,8 см³/мин;

- длина волны: возбуждение 264 нм;

- длина волны: эмиссия 313 нм;

- объем вводимой пробы 20 мм³;

- ориентировочное время выхода диметиламина 10,9 - 11,0 мин;

- линейный диапазон детектирования 0,1 - 2 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 0,1 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 20 раз).

11.1. За результат анализа принимают концентрацию диметиламина в хроматографируемом растворе, найденную по градуировочному графику в соответствии с величинами площадей хроматографических пиков, с учетом кратности разведения образца при необходимости.

Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

11.2. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

X₁, X₂ - результаты параллельных определений, мг/дм³;

r - значение предела повторяемости (табл. 3.1), при этом .

При невыполнении условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12.1. Результат количественного анализа представляют в виде:

- среднее арифметическое результатов определений, мг/дм³,

- граница абсолютной погрешности, мг/дм³.

- граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, табл. 3.1), %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "Содержание диметиламина в пробе воды менее 0,005 <3> мг/дм³".

--------------------------------

<3> 0,005 мг/м³ - предел обнаружения при анализе.

13.1. Контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6). Периодичность и формы контроля определяется руководством по качеству.

1. Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".

2. ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

3. ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

4. ГОСТ 29227 "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".

5. ГОСТ 1770 "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".

6. ГОСТ OIML R 111-1 "Государственная система обеспечения единства измерений (ГСИ). Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования".

7. ГОСТ Р 52501 "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".

8. ГОСТ 61 "Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия".

9. ГОСТ 20490 "Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия".

10. ГОСТ 4221 "Реактивы. Калий углекислый. Технические условия".

11. ГОСТ 4204 "Реактивы. Кислота серная. Технические условия".

12. ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".

13. ГОСТ 26678 "Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия (с Изменением N 1)".

14. ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

15. ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

16. ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная безопасность. Общие требования".

17. ГОСТ 12.4.009 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".

18. ГОСТ Р 31861 "Вода. Общие требования к отбору проб".