"МУК 4.1.3757-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций толпиралата в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 24.05.2022)

1. Разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (С.В. Кузьмин, В.Н. Ракитский, Н.Е. Федорова, А.А. Ивченкова, Н.А. Степанова).

2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 24 мая 2022 г.

3. Введены впервые.

1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для определения в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов массовой концентрации толпиралата в диапазонах 0,08 - 0,8 мг/м³ в воздухе рабочей зоны, 0,005 - 0,05 мг/м³ в атмосферном воздухе и 0,2 - 2,0 мкг/смыв в смывах с кожных покровов.

1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы организациями, осуществляющими исследования в области качества и безопасности воздуха рабочей зоны и атмосферного воздуха населенных мест, а также условий безопасности труда работающих.

1.3. МУК носят рекомендательный характер.

2.1. Толпиралат-(RS)1-[2-этил-4-[3-(2-метоксиэтокси)-2-метил-4-метилсульфонилбензоил] пиразол-3-ил] оксиэтил метил карбонат <1>. Брутто-формула C₂₁H₂₈N₂O₉S. Молекулярная масса 484,5 г/моль.

--------------------------------

<1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

2.2. Физические и химические свойства. Твердое вещество бледно-желтого цвета со специфическим запахом. Давление паров 0,59 мПа при плюс 25 °C. Растворимость в воде 26,5 мг/л при плюс 20 - 25 °C. Растворимость в органических растворителях (в мг/л при плюс 20 - 25 °C): ацетон - 148, 1,2-дихлорэтан - более 250, этилацетат - 92,3, н-гептан - 0,03, метанол - 11,6, н-октанол - 0,6. Коэффициент распределения н-октанол/вода 2,1 при плюс 40 °C. Температура плавления плюс 127 - 129 °C. Плотность 1,32 г/см³ при плюс 20 - 25 °C.

2.3. Острая пероральная токсичность для крыс и мышей (ЛД₅₀) более 2000 мг/кг, острая дермальная токсичность для крыс (ЛД₅₀) более 2000 мг/кг. Острая ингаляционная токсичность (ЛК₅₀) для крыс более 1600 мг/м³ воздуха (4 часа).

2.4. Гербицид, применяется для контроля роста широколиственных и травяных сорняков, включая амарант, амброзию полыннолистную, посконник коноплевый и лисохвост в кукурузе.

3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

4.1. Измерения концентраций толпиралата выполняют методом ВЭЖХ на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

4.2. Концентрирование вещества из воздуха осуществляют на сорбционные трубки, экстракцию проводят ацетонитрилом.

4.3. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2,0 нг.

5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в таблицах 2 - 4.

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

Примечание. Допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать технику безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостные хроматографы.

6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

6.3. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

7.1. При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией на приборы.

8.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетонитрила (при необходимости), подготовка подвижной фазы, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

8.2. Очистка ацетонитрила. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия).

8.3. Приготовление 0,01% раствора уксусной кислоты. Для приготовления 0,01% раствора уксусной кислоты в мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 0,1 см³ ледяной уксусной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

8.4. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ. В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 500 см³ 0,01% раствора уксусной кислоты, добавляют 500 см³ ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

8.5. Кондиционирование хроматографической колонки. Промывают колонку подвижной фазой (п. 8.4) не менее 30 минут при скорости подачи растворителя 0,8 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

8.6. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения.

8.6.1. Исходный раствор толпиралата для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают (0,0100 +/- 0,0005) г толпиралата, растворяют в 50 - 60 см³ ацетонитрила, доводят до метки, перемешивают. Раствор хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более 3 месяцев.

Растворы N 1 - 5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

8.6.2. Раствор N 1 толпиралата для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора толпиралата с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 8.6.1), разбавляют ацетонитрилом до метки.

Градуировочный раствор N 1 хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более 1 месяца.

8.6.3. Рабочие растворы N 2 - 5 толпиралата для градуировки (концентрация 0,1 - 1,0 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см³ раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 8.6.2), доводят до метки подвижной фазой (подготовленной по п. 8.4), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией толпиралата 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/см³ соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более 2 недель.

8.7. Установление градуировочной характеристики. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мкВ·сек) от концентрации толпиралата в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки N 2 - 5.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.3. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площадь пика толпиралата.

8.8. Контроль стабильности градуировочной характеристики. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов растворов для градуировки, содержание толпиралата в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,1 до 1,0 мкг/см³.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

где: A - величина расхождения, %;

X - концентрация вещества в растворе при контрольном измерении, мкг/см³;

C - известная концентрация градуировочного раствора, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см³;

B - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 10% при P = 0,95).

Если величина расхождения (A) превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов толпиралата, предусмотренных методикой измерения. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 8.7.

8.9. Подготовка салфеток для проведения смыва.

8.9.1. Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5%.

Навеску (25 +/- 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см³, растворяют в деионизованной воде, доводят водой до метки. Перемешивают.

8.9.2. Подготовка салфеток для проведения смыва. Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10x10 см, затем их последовательно обрабатывают 5%-м раствором углекислого натрия (при кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод, 2-кратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

9.1. Воздух рабочей зоны. Отбор проб осуществляют в соответствии с документами <2>.

--------------------------------

<2> ГОСТ 12.1.005 "Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны", Руководство Р 2.2.2006-05 "Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

Воздух с объемным расходом 1,0 дм³/мин аспирируют через сорбционные трубки. Для измерения концентрации толпиралата на уровне предела обнаружения (0,08 мг/м³) для воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 2,5 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C - 13 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру и хранят при температуре не выше минус 18 °C.

9.2. Атмосферный воздух. Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями <3>.

--------------------------------

<3> ГОСТ 17.2.3.01 "Охрана природы. Атмосфера. Правила контроля качества воздуха населенных пунктов".

Воздух с объемным расходом 2,0 дм³/мин аспирируют через сорбционные трубки. Для измерения концентрации толпиралата на уровне предела обнаружения (0,005 мг/м³) для атмосферного воздуха необходимо отобрать 40,0 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C - 13 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру и хранят при температуре не выше минус 18 °C.

9.3. Смывы с кожных покровов. Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими средствами индивидуальной защиты участков тела (лоб, лицо, шея, грудь, предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участок кожи, обрабатывают его для удаления загрязнений, фиксируют площадь (не менее 200 см²). При необходимости отбирают фоновые смывы.

Смыв выполняют способом обмыва фиксированного участка кожи этиловым спиртом, помещая 20 см³ в стеклянную емкость. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают этот участок сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C - 7 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре не выше минус 18 °C.

10.1. Воздух рабочей зоны и атмосферный воздух. Вещество с сорбционных трубок экстрагируют следующим образом: содержимое сорбционной трубки (сорбент и стекловату) переносят в мерную пробирку вместимостью 10 см³, заливают 5 см³ ацетонитрила, помещают на ультразвуковую ванну на 5 мин. Растворитель декантируют в круглодонную колбу вместимостью 50 см³, экстракцию повторяют еще дважды.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше плюс 30 °C досуха.

Сухой остаток растворяют в 2 см³ подвижной фазы (подготовленной по п. 8.4), тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 10.3.

10.2. Смывы с кожных покровов. Пробу смыва сливают (через воронку) в колбу для упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку, помещают в конусную химическую воронку, установленную в муфту колбы для упаривания, тщательно отжимают и промывают этиловым спиртом дважды порциями по 10 см³, предварительно ополаскивая растворителем емкость, в которой находилась проба.

Объединенный раствор упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше плюс 40 °C досуха. Остаток растворяют в 2 см³ подвижной фазы, подготовленной по п. 8.4 и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 10.3.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию толпиралата в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).

10.3. Условия хроматографирования.

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

- жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором;

- колонка стальная длиной 150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая сорбент C18, зернением 5 мкм;

- температура колонки: плюс 40 °C;

- подвижная фаза: ацетонитрил - 0,01%-я уксусная кислота (50:50, по объему);

- скорость потока элюента: 0,8 см³/мин;

- рабочая длина волны: 254 нм;

- объем вводимой пробы: 20 мм³;

- ориентировочное время выхода толпиралата: 6,4 - 6,6 мин;

- линейный диапазон детектирования: 2,0 - 20 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор толпиралата с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по п. 8.4).

11.1 Воздушная среда. Концентрацию толпиралата в пробе воздуха (X), мг/м³, рассчитывают по формуле:

где C - концентрация толпиралата в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величинами площадей хроматографических пиков, мкг/см³;

W - объем раствора, подготовленного для хроматографирования, см³;

Кр - кратность разбавления (если экстракт подвергался разбавлению);

Vt - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный нормальным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 0 °C), дм³.

где T - температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), °C;

P - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

u - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин;

t - длительность отбора пробы, мин;

R - коэффициент, равный 0,359 для атмосферного воздуха.

11.2. Смывы с кожных покровов. Концентрацию толпиралата в пробе смыва X, мкг/смыв, рассчитывают по формуле:

где C - концентрация толпиралата в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величинами площадей хроматографических пиков, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³.

Кр - кратность разбавления (если экстракт подвергался разбавлению);

Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

12.1. Результат количественного анализа представляют в виде:

где - среднее арифметическое результатов определений, мг/м³, мкг/смыв;

- граница абсолютной погрешности, мг/м³.

где - граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, таблица 1), %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: содержание толпиралата в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,08 мг/м³; в пробе атмосферного воздуха - менее 0,005 мг/м³; в пробе смыва - менее 0,2 мкг/смыв <4>.

--------------------------------

<4> 0,08 мг/м³; 0,005 мг/м³; 0,2 мкг/смыв - пределы обнаружения толпиралата при отборе 2,5 дм³ воздуха рабочей зоны; 40 дм³ атмосферного воздуха; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва 200 см²) с кожных покровов соответственно.

13.1. Организация контроля качества измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6).

13.2. Показатели повторяемости и воспроизводимости, пределы повторяемости и воспроизводимости при P = 0,95 приведены в таблице 5.

13.3. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздушной среды. Объем отобранных для контроля процедуры выполнения анализа проб воздуха должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора проб экстракт делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики, и получают результат анализа исходной рабочей пробы - X. Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (C_д) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы с добавкой - X'. Результаты анализа исходной рабочей пробы (X) и рабочей пробы с добавкой (X') получают в условиях повторяемости (один аналитик, использование одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.).

Величина добавки должна удовлетворять условию:

где - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой), мг/м³.

Допустимо характеристику погрешности результатов анализа при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражения , с последующим уточнением по мере накопления информации.

Контроль проводят путем сравнения результата контрольной процедуры К_к с нормативом контроля К.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

где , , C_д - среднее арифметическое результатов параллельных определений содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг;

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (1) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.4. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости R:

где X₁, X₂ - результаты измерений в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/м³;

Согласно таблице 5: (воздух рабочей зоны), (атмосферный воздух), (смывы с кожи).

Если выполняется условие (2), то воспроизводимость измерений считается удовлетворительной.

При превышении норматива контроля воспроизводимости эксперимент повторяют, при повторном превышении указанного норматива выясняют причины и по возможности их устраняют.

1. Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".

2. Приказ Ростехнадзора от 15.12.2020 N 536 "Об утверждении федеральных норм и правил в области промышленной безопасности "Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением".

3. Руководство Р 2.2.2006-05 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда".

4. ГОСТ Р ИСО 5725-(1 - 6) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

5. ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

6. ГОСТ 29227 "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".

7. ГОСТ 1770 "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".

8. ГОСТ OIML R 111-1 "Государственная система обеспечения единства измерений (ГСИ). Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования".

9. ГОСТ Р 51945 "Аспираторы. Общие технические условия".

10. ГОСТ Р 52501 "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".

11. ГОСТ 20490 "Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия".

12. ГОСТ 4221 "Реактивы. Калий углекислый. Технические условия".

13. ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".

14. ГОСТ 83 "Реактивы. Натрий углекислый. Технические условия".

15. ГОСТ 5962 "Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия".

16. ГОСТ 61 "Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия"

17. ГОСТ 26678 "Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия".

18. ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

19. ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

20. ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования".

21. ГОСТ 12.4.009 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".

22. ГОСТ 17.2.3.01 "Охрана природы. Атмосфера. Правила контроля качества воздуха населенных пунктов".

23. ГОСТ 12.1.005 "Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".