"Методические указания по определению бициклада в растительном материале хроматографией в тонком слое"
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6113-91)

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Бициклад - 0,0-диметил-0-(6-хлоробицикло/3,2,0/гептадиен-1,5-ил)фосфат. Относится к классу фосфорорганических инсектицидов.

Структурная формула:

Синонимы - гептенофос, хостаквик.

Химически чистое вещество бициклада - жидкость, T кип. - 90 - 91 °C.

Препарат хорошо растворим в ацетоне, метаноле, ксилоле (при 25 °C до 1000 г/л), хуже - в н-гексане (130 г/л).

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении бициклада из сырья облепихи и шиповника 50% водным ацетоном. Очистка экстракта проводится ацетонитрилом и на колонке с активированным углем с последующим количественным определением методом ТСХ на пластинках "Силуфол".

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.

Гексан ч, хч, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетонитрил ч, ТУ 6-09-3534-74.

Хлороформ ч, ГОСТ 20015-74.

Натрий сернокислый безводный, свежепрокаленный, ГОСТ 4166-76.

Аммиак, 25% водный р-р, ч, ГОСТ 3760-79.

Серебро азотнокислое, ГОСТ 1277-81.

Пластинки "Силуфол" UV-254.

Уголь активированный ОУ-2.

Проявляющий реагент:

1. 0,25 г азотнокислого серебра растворяют в 2,5 мл дистиллированной воды, прибавляют 3,5 мл 25% раствора аммиака (плотностью 0,9 г/куб. см) и доводят объем до 50 мл ацетоном.

Стандартный раствор бициклада в гексане с содержанием 1 мг/мл. Хранят в холодильнике.

Колбы плоскодонные 300 мл, ГОСТ 25336-82.

Колбы круглодонные со шлифами для отгонки растворителей, ГОСТ 25336-82.

Делительные воронки на 250 мл, ГОСТ 25336-82.

Воронки, ГОСТ 25336-82.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.

Колонки для адсорбционной хроматографии (300 x 15 мм).

Аппарат для встряхивания.

Испаритель ротационный вакуумный, МРТУ 42-2589-66.

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Микропипетки 0,1 - 0,2 мм, ГОСТ 20292-74.

Лампа УФ кварцевая, ТУ 16-535-280-74 или аналогичная.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.

2.4.1. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с требованиями, изложенными в "Унифицированных правилах отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденных Минздравом СССР, N 2051-79, 21.08.1979.

Для анализа отбирают среднюю пробу.

2.4.2. Подготовка пластинок "Силуфол"

Перед нанесением экстракта пластинки "Силуфол" прогоняем в системе аммиак - ацетон (1:1).

2.5.1. Экстракция. Анализируемые пробы - навески (5 г сухого, 50 г сырого сырья) помещают в конические колбы емкостью 300 мл, заливают 50 мл (сухое сырье) или 200 мл (сырое сырье) 50% водного ацетона и помещают на аппарат для встряхивания на 2,5 - 3 часа. Затем пробы фильтруют через бумажный фильтр, остаток в колбе и на фильтре промывают дважды 30 мл 50% водного ацетона. Водно-ацетоновые экстракты объединяют и переносят в делительную воронку. Бициклад из водного ацетона трижды экстрагируют хлороформом порциями по 30 мл. Далее хлороформную фракцию фильтруют в круглодонную колбу через безводный сернокислый натрий и хлороформ отгоняют на роторном испарителе при температуре 50 °C. К сухому экстрактному остатку приливают 5 мл ацетонитрила и встряхивают до полного растворения. Затем приливают 100 мл воды и трижды экстрагируют н-гексаном порциями по 30 мл. Собирают гексановую фракцию. Н-гексан отгоняют на роторном испарителе до 1 - 2 мл. Дальнейшую очистку проводят на колонке с активированным углем.

2.5.2. Очистка на колонке. Колонки диаметром 15 мм заполняют 2 г активированного угля и промывают 30 мл хлороформа, который отбрасывается. Хлороформный экстракт из круглодонной колбы переносят на колонку и элюируют 60 - 70 мл хлороформа.

2.5.3. Хроматографирование

Количественное определение бициклада проводят путем сравнения размера и интенсивности окраски пятен бициклада в рабочей пробе с пятнами стандарта.

Содержание препарата в анализируемой пробе рассчитывают по формуле:

где:

Y - искомое количество бициклада в пробе;

X - количество бициклада в навеске;

M - вес навески, кг.

Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.