"МУК 4.1.3030-12. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств ацетохлора в воде методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 03.07.2012)

1. Разработаны ФБУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора (В.Н. Ракитский, Т.В. Юдина, Л.В. Горячева, С.К. Рогачева).

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 3 июля 2012 г.

4. Введены в действие с момента утверждения.

5. Введены впервые.

Свидетельство о метрологической аттестации N 00119.22.05.12 от 22.05.2012.

Настоящие методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для определения остаточных количеств ацетохлора в воде в диапазоне 0,0005 - 0,005 мг/куб. дм.

Ацетохлор

2-Хлор-N-этоксиметил-6'-этилацет-о-толуидид (IUPAC)

При соблюдении всех регламентируемых условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерения при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 2.

Методика основана на определении ацетохлора с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с электронно-захватным детектором (ЭЗД) после концентрирования анализируемой пробы воды на патрон для твердофазной экстракции Sep Pak Classic C18 с последующим элюированием смесью гексан-изопропанол.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Примечание. Возможно использование реактивов иных производителей с более высокой квалификацией.

Примечание. Допускается использование других вспомогательных средств измерений и устройств аналогичного назначения, технические характеристики которых не уступают указанным, а также материалов, обеспечивающих нормативы точности при проведении измерений.

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

4.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/кв. см), необходимо соблюдать "Правила устройства и безопасной эксплуатации стационарных компрессорных установок, воздухопроводов и газопроводов под давлением", ПБ 03-576-03. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе, освоивших данную методику и подтвердивших экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление градуировочных растворов и раствора внесения, установление градуировочной характеристики, приготовление смеси растворителей для очистки экстрактов на патроне, подготовка патрона Sep Pak Classic C18.

7.1.1. н-Гексан

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над безводным карбонатом калия.

7.1.2. Ацетон

7.2.1. Исходный раствор ацетохлора для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,01 г ацетохлора, растворяют в 50 - 60 куб. см ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение 6 месяцев.

7.2.2. Раствор N 1 ацетохлора для градуировки (концентрация 5,0 мкг/куб. см)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 5,0 куб. см исходного раствора ацетохлора с концентрацией 100 мкг/куб. см (п. 7.2.1), разбавляют ацетоном до метки.

Градуировочный раствор N 1 хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение месяца.

7.2.3. Рабочие растворы N 2 - 5 ацетохлора для градуировки (концентрация 0,025 - 0,25 мкг/куб. см)

В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 0,5; 1,0; 2,0 и 5,0 куб. см градуировочного раствора N 1 с концентрацией 5,0 мкг/куб. см (п. 7.2.2), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрациями ацетохлора 0,025; 0,05; 0,1 и 0,25 мкг/куб. см.

Растворы хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение 14 дней.

7.2.4. Рабочий раствор N 6 ацетохлора для внесения (концентрация 0,5 мкг/куб. см)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10,0 куб. см градуировочного раствора N 1 с концентрацией 5,0 мкг/куб. см (п. 7.2.2), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор N 6 для внесения с концентрацией ацетохлора 0,5 мкг/куб. см.

Раствор хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение 14 дней.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено" и контроля качества результатов измерений методом добавок.

Градуировочную характеристику, выражающую линейную (с угловым коэффициентом) зависимость площади пика (мВ · с) от концентрации ацетохлора в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки N 2 - 5.

В испаритель хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.2. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков (мВ · с) ацетохлора, на основании которых стоят градуировочную зависимость.

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 25 куб. см изопропанола, доводят до метки гексаном, перемешивают.

Патрон Sep Pax Classic C18 устанавливают на аллонж с прямым отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом Льюера объемом не менее 10 куб. см, используемый в качестве емкости для элюента.

Концентрирующий патрон промывают последовательно 5 куб. см метанола, затем 3 куб. см деионизованной воды. Процедуру проводят с использованием вакуума, скорость потока растворителей через патрон не должна превышать 5 куб. см/мин., при этом нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

Примечание. В отсутствие специального аллонжа жидкость продавливают через патрон с помощью медицинского шприца, скорость продавливания раствора не должна превышать 1 - 2 капли в секунду.

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТ Р 51592-2000 "Вода. Общие требования к отбору проб" и "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).

Отобранные пробы воды хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более 7 дней. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С.

Перед анализом образцы воды фильтруют через неплотный бумажный фильтр.

Образец отфильтрованной воды объемом 100 куб. см помещают в химический стакан вместимостью 200 - 300 куб. см. Затем с помощью медицинского шприца (или разряжения, создаваемого водоструйным насосом) пробу наносят на концентрирующий патрон Sep Pak Classic C18, подготовленный по п. 7.5, со скоростью пропускания раствора 1 - 2 капли в секунду. Патрон освобождают от следов влаги (осушают) с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом.

Ацетохлор элюируют с патрона 3 куб. см смеси гексан-изопропанол (3:1, по объему), собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 50 куб. см, упаривают досуха, остаток растворяют в 2 куб. см гексана и анализируют на содержание ацетохлора в условиях хроматографирования по п. 9.2.

Газовый хроматограф, снабженный электронно-захватным детектором.

Колонка капиллярная DB-1701, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм.

Температура: детектора - 300 °С, испарителя - 250 °С.

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 150 °С, выдержка 1 мин., нагрев колонки со скоростью 10°/мин. до температуры 220 °С, выдержка 3 мин., затем нагрев колонки со скоростью 25°/мин. до температуры 270 °С, выдержка 2 мин.

Газ 1 (азот): давление 70,0 кПа, 32,1 см/с, поток 1,5 куб. см/мин.

Газ 2: деление потока 1:6,8; сброс 10,2 куб. см/мин.

Ориентировочное время выхода ацетохлора 9,2 мин.

Хроматографируемый объем: 1 куб. мм.

Линейный диапазон детектирования: 0,025 - 0,25 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор ацетохлора с концентрацией 0,25 мкг/куб. см, разбавляют гексаном (не более чем в 50 раз).

Содержание ацетохлора в пробе (Х, мг/куб. дм) рассчитывают по формуле:

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

При невыполнении условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

Примечание. Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки данных, включенной в аналитическую систему.

Результат анализа представляют в виде:

где - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание вещества в пробе воды менее - 0,0005 мг/куб. дм" <*>.

--------------------------------

<*> 0,0005 мг/куб. дм - предел обнаружения в воде.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание ацетохлора в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,025 до 0,25 мкг/куб. см.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

где:

Х - концентрация ацетохлора в пробе при контрольном измерении, мкг/куб. см;

С - известная концентрация градуировочного раствора ацетохлора, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/куб. см;

2 - погрешность градуировочной характеристики, %.

Если величина расхождения (А) превышает 2%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов ацетохлора, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 7.3.

Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

где:

- характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/куб. дм, при этом:

где - граница абсолютной погрешности, мг/куб. дм:

где - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):