"МУК 4.1.2589-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций тифенсульфурон-метила в атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"
(утв. Роспотребнадзором 26.03.2010)

1. Разработаны ФГУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 03.12.2009 N 3).

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 26 марта 2010 г.

4. Введены в действие с 26 марта 2010 г.

5. Введены впервые.

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в атмосферном воздухе массовой концентрации тифенсульфурон-метила в диапазоне 0,005 - 0,05 мг/куб. м.

3-[(4-метокси-6-метил-1,3,5-триазин-2-ил)карбамоилсульфамоил]тиофен-2-карбоновая кислота, метиловый эфир (IUPAC):

Структурная формула (не приводится).

Область применения

Тифенсульфурон-метил - гербицид системного действия класса сульфонилмочевин, рекомендуется к применению на посевах зерновых культур для подавления роста широкого спектра однолетних и некоторых многолетних злаковых сорняков.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) тифенсульфурона в атмосферном воздухе - 0,01 мг/куб. м.

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 25%, при доверительной вероятности 0,95.

Измерения концентраций тифенсульфурон-метила выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование тифенсульфурон-метила из воздуха осуществляют на бумажный фильтр "синяя лента", экстракцию с фильтров проводят этиловым спиртом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1,0 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 92,93%.

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Допускается использование реактивов иных производителей с более высокой квалификацией, не требующих выполнения п. 7.1 (очистки ацетонитрила).

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-88, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-79, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетонитрила (при необходимости), подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров "синяя лента", отбор проб воздуха.

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.2.1. Подвижная фаза N 1 (измерение по п. 7.5.1.1)

В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 650 куб. см бидистиллированной или деионизованной воды, 1,0 куб. см ортофосфорной кислоты, 350 куб. см ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.2.2. Подвижная фаза N 2 (измерение по п. 7.5.1.2)

В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 550 куб. см бидистиллированной или деионизованной воды, 1,0 куб. см ортофосфорной кислоты, 450 куб. см ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2.1 или 7.2.2) при скорости подачи растворителя 0,3 куб. см/мин. (измерение по п. 7.5.1.1) или 1,0 куб. см/мин. (измерение по п. 7.5.1.2) до установления стабильной базовой линии.

7.4.1. Исходный раствор тифенсульфурон-метила для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,0100 г тифенсульфурон-метила, растворяют в 50 - 60 куб. см ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в морозильной камере при температуре -18 °C в течение 3 месяцев.

Растворы N 1 - 6 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.4.2. Раствор N 1 тифенсульфурон-метила для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10 куб. см исходного раствора тифенсульфурон-метила с концентрацией 100 мкг/куб. см (п. 7.4.1), разбавляют ацетонитрилом до метки.

Градуировочный раствор N 1 хранят в морозильной камере при температуре -18 °C в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено - найдено".

7.4.3. Рабочие растворы N 2 - 6 тифенсульфурон-метила для градуировки (концентрация 0,05 - 1,0 мкг/куб. см). В 5 мерных колб вместимостью 100 куб. см помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 куб. см градуировочного раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/куб. см (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 6 с концентрацией тифенсульфурон-метила 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/куб. см соответственно.

Рабочие растворы сразу после приготовления помещают в холодильник, где хранят при температуре 4 - 6 °C не более 12 ч.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (относительные единицы) от концентрации тифенсульфурон-метила в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки N 2 - 5 или N 3 - 6 (хроматографирование по п. 7.5.1.1 или п. 7.5.1.2 соответственно).

В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.5.1.1 или п. 7.5.1.2.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков, на основании которых строят градуировочную зависимость.

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2 растворов для градуировки различной концентрации. Если значения площадей отличаются более чем на 20% от параметров градуировочной характеристики, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

7.5.1. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах.

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны.

7.5.1.1. Хроматографическая колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 2,0 мм, содержащая Spherisorb(R) S5 ODS 2, зернением 5 мкм.

Температура колонки: комнатная.

Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.

Скорость потока элюента: 0,3 куб. см/мин.

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (35:65:0,1 по объему).

Рабочая длина волны: 250 нм.

Ориентировочное время выхода тифенсульфурон-метила: 7,2 - 7,4 мин.

Линейный диапазон детектирования: 1 - 10 нг.

7.5.1.2. Хроматографирование по п. 7.5.1.2 осуществляется для определения в одной пробе 2 действующих веществ класса сульфонилмочевин-тифенсульфурон-метила и трибенурон-метила.

Хроматографическая колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100 C18 зернением 8 мкм.

Температура колонки: комнатная.

Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.

Скорость потока элюента: 1,0 куб. см/мин.

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (45:55:0,1 по объему).

Рабочая длина волны: 250 нм.

Ориентировочное время выхода тифенсульфурон-метила: 4,9 - 5,1 мин.

Ориентировочное время выхода трибенурон-метила: 9,8 - 10,0 мин.

Линейный диапазон детектирования: 2 - 20 нг.

Диаметр бумажного фильтра "синяя лента" должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетонитрилом порциями 25 - 30 куб. см, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02-81 "ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест". Воздух с объемным расходом 4 - 5 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации тифенсульфурон-метила на уровне предела обнаружения (0,005 мг/куб. м) необходимо отобрать 40 куб. дм воздуха, для определения 0,8 ОБУВ (0,008 мг/куб. м) - 25 куб. дм воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике при температуре 4 - 6 °C - 5 дней, в морозильной камере при температуре -18 °C - 20 дней.

Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 150 куб. см, заливают 10 куб. см этилового спирта, помещают на встряхиватель на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями растворителя объемом 10 куб. см, выдерживая на встряхивателе по 10 мин.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °C почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 4 куб. см подвижной фазы N 1 (подготовленной по п. 7.2.1) или 2 куб. см подвижной фазы N 2 (подготовленной по п. 7.2.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.5.1.1 или п. 7.5.1.2 соответственно.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию тифенсульфурон-метила в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 0,5 мкг/куб. см или 1,0 мкг/куб. см (хроматографирование по п. 7.5.1.1 или п. 7.5.1.2 соответственно), разбавляют соответствующей подвижной фазой (не более чем в 50 раз).

Концентрацию тифенсульфурон-метила в пробе воздуха (X), мг/куб. м, рассчитывают по формуле:

где:

T - температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), °C;

P - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

u - расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;

t - длительность отбора пробы, мин.;

R - коэффициент, равный 0,357 для атмосферного воздуха.

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

Примечание: Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

Результат количественного анализа представляют в виде:

ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/куб. м;

где дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, таблица), %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание тифенсульфурон-метила в пробе атмосферного воздуха менее 0,005 мг/куб. м <*>".

--------------------------------

<*> 0,005 мг/куб. м - предел обнаружения при отборе 40 куб. дм воздуха.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

Если выполняется условие (3), то воспроизводимость измерений считается удовлетворительной.

При превышении норматива контроля воспроизводимости эксперимент повторяют, при повторном превышении указанного норматива выясняют причины и по возможности их устраняют.