"МУК 4.1.2026-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств дельтаметрина в кукурузном масле методом газожидкостной хроматографии"
(утв. Роспотребнадзором 17.10.2005)

1. Подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Разработчики методов указаны в каждом из них.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

Настоящие Методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения массовой концентрации дельтаметрина в кукурузном масле в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.

Дельтаметрин - действующее вещество инсектицидов Децис, КЭ (25 г/л), Децис Экстра, КЭ (125 г/л) и Децис Профи, ВДГ (250 г/кг), фирма-производитель Байер Кроп Сайенс (Германия).

(S)-альфа-циано-3-феноксибензил(1R,3R)-3-(2,2-дибромвинил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат (ИЮПАК).

[1R-[1-альфа(S*),3-альфа]]-циано(3феноксифенил)метил3-(2,2-дибромэтенил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат (С.А.).

Структурная формула (не приводится).

Рекомендуемый норматив для дельтаметрина в кукурузном масле - 0,02 мг/кг.

Область применения препарата

Дельтаметрин - инсектицид контактного и кишечного действия из группы синтетических пиретроидов. Он эффективно подавляет развитие вредителей из отрядов жесткокрылых, перепончатокрылых, прямокрылых, двукрылых и чешуекрылых (имаго и личинки) в посевах зерновых и овощных культур, кукурузы, хлопчатника, на плантациях картофеля, технических и плодовых культур при норме расхода 5 - 25 г д.в./га.

Зарегистрирован в России под торговыми названиями Децис, КЭ (25 г/л), Децис Экстра, КЭ (125 г/л) и Децис Профи, ВДГ (250 г/кг) в качестве инсектицида для применения в посевах пшеницы, ячменя, кукурузы, пастбищных трав, в посадках капусты и картофеля, на плодовых культурах путем опрыскивания вегетирующих растений.

Метрологические характеристики метода представлены в таблицах 1 и 2.

Методика основана на определении вещества с помощью газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с электронозахватным детектором (ЭЗД). Контроль дельтаметрина в матрице осуществляется по содержанию вещества после экстракции его из масла водным ацетонитрилом, очистки экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с силикагелем и концентрирующем патроне Диапак-диол.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Дельтаметрин, аналитический стандарт фирмы Байер (Германия) с содержанием д.в. 99,6%

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 + 5) °С и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с силикагелем и концентрирующих патронов Диапак-диол.

7.1.1. Очистка н-гексана

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения ее окрашивания в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7.1.2. Очистка этилацетата

Этилацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8 - 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г силикагеля в 20 куб. см гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 15 куб. см гексана со скоростью 1 - 2 капли в сек., после чего она готова к работе.

В круглодонную колбу вместимостью 10 куб. см помещают 1 куб. см градуировочного раствора N 1 дельтаметрина с концентрацией 1 мкг/куб. см в гексане (п. 7.6.2), отдувают растворитель током азота, остаток растворяют в 3 куб. см гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с силикагелем, подготовленную по п. 7.2. Промывают колонку 50 куб. см гексана со скоростью 1 - 2 капли в сек., элюат отбрасывают. Затем колонку промывают 50 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1, по объему). Фракционно (по 5 куб. см) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 2 куб. см гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и анализируют на содержание дельтаметрина по п. 9.5.

Концентрирующий патрон промывают последовательно с помощью медицинского шприца 20 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1, по объему) и 10 куб. см гексана со скоростью 5 куб. см/мин.

Засыпают готовую насадку (3% SE-30 на Хромосорбе W/HP) в стеклянную колонку и уплотняют под вакуумом. Колонку устанавливают в термостат хроматографа и, не подсоединяя к детектору, кондиционируют при температуре 270 °С и скорости газа-носителя 2,5 куб. см/мин. в течение 8 - 10 часов.

7.6.1. Исходный раствор дельтаметрина для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,010 г дельтаметрина, растворяют в 40 - 50 куб. см гексана, доводят гексаном до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение 3-х месяцев.

7.6.2. Раствор дельтаметрина N 1 для градуировки (концентрация 1 мкг/куб. см)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 1 куб. см исходного раствора дельтаметрина с концентрацией 100 мкг/куб. см (п. 7.6.1), разбавляют гексаном до метки. Этот раствор используют для приготовления рабочих градуировочных растворов N 2 - 5, а также проб масла с внесением при оценке полноты извлечения дельтаметрина из исследуемых образцов.

Градуировочный раствор N 1 хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение месяца.

7.6.3. Рабочие растворы N 2 - 5 дельтаметрина для градуировки (концентрация 0,01 - 0,1 мкг/куб. см)

В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 куб. см градуировочного раствора N 1 дельтаметрина с концентрацией 1 мкг/см (п. 7.6.2), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией дельтаметрина 0,01; 0,02; 0,05 и 0,10 мкг/куб. см соответственно.

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ х с) от концентрации дельтаметрина в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки.

В инжектор хроматографа вводят по 2 куб. мм каждого градуировочного раствора (п. 7.6.3) и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТом 10852-86 "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб". Масло хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре 4 - 6 °С. В некоторых случаях масло получают из зерна кукурузы экстракцией органическими неполярными растворителями (петролейный и диэтиловый эфиры) непосредственно перед проведением анализа.

Образец масла массой 5 г помещают в коническую колбу вместимостью 250 куб. см, добавляют 100 куб. см смеси ацетонитрил - вода (80:20, по объему) и помещают на встряхиватель на 30 мин. Эмульсию центрифугируют 5 мин. при 6000 g и отделяют водно-ацетонитрильную фазу. Операцию экстракции масляной фазы повторяют, используя 50 куб. см смеси ацетонитрил - вода (80:20, по объему), и отделяют водно-ацетонитрильную фазу центрифугированием. Измеряют объем объединенной водно-ацетонитрильной фазы, отбирают 2/5 объема этой фазы (эквивалентна 2 г образца) и переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см.

К экстракту, полученному по п. 9.1 и помещенному в делительную воронку, прибавляют 15 куб. см гексана и воронку интенсивно встряхивают в течение 2-х мин. После разделения фаз нижний водно-ацетонитрильный слой переносят в круглодонную колбу и упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка (7 - 10 куб. см) при температуре 40 °С. К водному остатку прибавляют 10 куб. см ацетона, перемешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 100 куб. см. В воронку вносят 30 куб. см гексана, интенсивно встряхивают воронку в течение 2-х мин. После разделения фаз верхний гексановый слой отделяют, фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помещенный на бумажный фильтр в конусной воронке, в круглодонную колбу вместимостью 150 куб. см. Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды, используя 30 и 20 куб. см гексана. Объединенную гексановую фазу, пропущенную через слой сульфата натрия, упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С.

Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по п. 9.2, растворяют в 3 куб. см гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 7.2. Колбу обмывают трижды порциями по 3 куб. см гексана, которые также наносят на колонку. Промывают колонку 40 куб. см гексана со скоростью 1 - 2 капли в сек., элюат отбрасывают. Дельтаметрин элюируют 40 куб. см смеси гексан - этилацетат (9:1, по объему) в круглодонную колбу вместимостью 100 куб. см. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 40 °С.

Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по п. 9.3, растворяют при помощи ультразвуковой ванны в 2 куб. см гексана, и раствор переносят в подготовленный концентрирующий патрон (п. 7.4). Дельтаметрин элюируют 7 куб. см гексана, отбрасывая 1 куб. см и собирая последующие 6 куб. см элюата в круглодонную колбу вместимостью 25 куб. см. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Остаток в колбе растворяют в 2 куб. см гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и анализируют на содержание дельтаметрина по п. 9.5.

Колонка хроматографическая стеклянная 1000 х 2 мм, неподвижная фаза - 3% SE-30 на Хромосорбе W/HP (0,12 - 0,15 мм)

Температура испарителя - 270 °С, термостата колонки - 240 °С, детектора - 320 °С

Скорость потока газа-носителя (азот) - 50 куб. см/мин.

Объем вводимой пробы - 2 куб. мм

Ориентировочное время выхода дельтаметрина: 2,7 - 2,8 мин.

Линейный диапазон детектирования: 0,02 - 0,2 нг

Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю площадь пика

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,1 мкг/куб. см, разбавляют гексаном.

Содержание дельтаметрина рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

ВНИИ фитопатологии.