"МУК 4.1.2027-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств хлорсульфоксима в воде методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Роспотребнадзором 17.10.2005)

1. Подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воде водоемов массовой концентрации хлорсульфоксима в диапазоне 0,0005 - 0,01 мг/куб. дм.

Хлорсульфоксим - действующее вещество препарата КРОСС.ВГР (д.в. 92 г/л хлорсульфоксима к-ты + 47 г/л хлорсульфурона к-ты), производитель Каре Интернешнл. Инк (США).

1-(2-хлорфенилсульфонил)-3-(4-изопропилидениминоокси-6-диметиламино-1,3,5-триазин-2-ил)мочевина (IUPAC).

Структурная формула (не приводится).

Область применения препарата:

Препарат КРОСС, ВГР (д.в. 92 г/л хлорсульфоксима к-ты + 47 г/л хлорсульфурона к-ты) рекомендуется в качестве гербицида для борьбы с сорной растительностью на посевах зерновых колосовых культур и льна с нормой расхода 100 - 150 мл/га.

ПДК хлорсульфоксима в воде водоемов - 0,001 мг/куб. дм.

Предел обнаружения: 0,0005 мг/куб. дм.

Диапазон определяемых концентраций: 0,0005 - 0,01 мг/куб. дм.

Среднее значение извлечения: 86,32%.

Стандартное отклонение: 5,74%.

Доверительный интервал среднего результата: +/- 8,62%.

Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором после экстракции из анализируемой пробы воды (после подкисления) хлористым метиленом, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление градуировочных растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.

7.1.1. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.1.2. Очистка н-гексана

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой - до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

В мерную колбу вместимостью 250 куб. см помещают 10 г едкого натра, растворяют в 100 - 150 куб. см дистиллированной воды, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 6,9 куб. см орто-фосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 500 куб. см ацетонитрила, 500 куб. см деионизованной воды и 0,5 куб. см 85%-ной орто-фосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.4) в течение 30 минут при скорости подачи растворителя 1 куб. см/мин. до установления стабильной базовой линии.

7.6.1. Исходный раствор хлорсульфоксима для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,01 г хлорсульфоксима, растворяют в 50 - 70 куб. см ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.

Растворы N 1 - 6 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного градуировочного раствора.

7.6.2. Раствор N 1 хлорсульфоксима для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/куб. см)

В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10 куб. см исходного градуировочного раствора с концентрацией 100 мкг/куб. см (п. 7.6.1), разбавляют ацетонитрилом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения хлорсульфоксима из исследуемых образцов.

7.6.3. Рабочие растворы N 2 - 6 хлорсульфоксима для градуировки (концентрация 0,05 - 1,0 мкг/куб. см)

В 5 мерных колб вместимостью 100 куб. см помещают по 0,5; 1,0; 2,5; 5,0 и 10,0 куб. см градуировочного раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/куб. см (п. 7.6.2), доводят до метки подвижной фазой (приготовленной по п. 7.4), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 6 с концентрацией хлорсульфоксима 0,05; 0,1; 0,25; 0,5 и 1,0 мкг/куб. см соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике не более суток.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации хлорсульфоксима в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5-ти растворам для градуировки N 2 - 6.

В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.2. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТ Р 51592-2000.

Отобранные пробы воды анализируют в день отбора или хранят при 4 °С в течение 3-х дней. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре ниже -12 °С.

Водную фазу переносят в коническую колбу вместимостью 300 - 400 куб. см, подкисляют с помощью 1 М орто-фосфорной кислоты до pH 3, контролируя его значение по иономеру. Раствор переносят в делительную воронку вместимостью 500 куб. см, добавляют 50 куб. см хлористого метилена, интенсивно встряхивают воронку в течение 2-х мин. Нижний органический слой собирают в коническую колбу вместимостью 200 куб. см. Операцию экстракции повторяют еще дважды, используя по 30 куб. см хлористого метилена. Объединенную органическую фазу фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помещенный в конусную химическую воронку на бумажном фильтре "красная лента", в круглодонную колбу и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 куб. см ацетонитрила, добавляют 1 куб. см подвижной фазы, перемешивают и анализируют содержание хлорсульфоксима по п. 9.2.

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-Elmer (США)

Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100 С18, зернением 8 мкм

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода - орто-фосфорная кислота (50:50:0,05, по объему)

Скорость потока элюента: 1,0 куб. см/мин.

Рабочая длина волны: 230 нм

Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу

Объем вводимой пробы: 20 куб. мм

Ориентировочное время выхода хлорсульфоксима: 7,3 - 7,5 мин.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор хлорсульфурона с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой.

Содержание хлорсульфоксима в пробе воды рассчитывают по формуле:

где:

X - содержание хлорсульфоксима в пробе, мг/кг;

A - концентрация хлорсульфоксима, найденная по градуировочному графику, мкг/куб. см;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;

m - объем анализируемого образца, куб. см.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6.2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана).