"МУК 4.1.1020-01. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика выполнения измерений массовой концентрации свободных альдегидов (в том числе формальдегида) в белковой оболочке фотометрическим методом. Методические указания"
(утв. Минздравом России 13.02.2001)

1. Разработаны: ОАО "Лужский завод "Белкозин" (Генеральный директор Созонов В.Ю.); научно-техническим центром "Метрология-Сервис" (Генеральный директор проф. Бегунов А.А.); кафедрой гигиены питания и диетологии Санкт-Петербургской медицинской академии им. И.И. Мечникова (заведующий кафедрой проф. Доценко В.А.).

2. Метрологическую аттестацию провел ГНЦ "ВНИИМ им. Д.И. Менделеева" (руководитель лаборатории Государственных эталонов в области аналитических измерений Конопелько Л.А.). Свидетельство об аттестации N 2420/78-99 от 15.11.99.

3. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России (протокол N 6 от 1 февраля 2001 г.).

4. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации - Первым заместителем Министра здравоохранения 13 февраля 2001 г.

5. Введены впервые.

Настоящая методика предназначена для измерения фотометрическим методом массовой концентрации свободных альдегидов (в т.ч. формальдегида) в искусственной белковой оболочке диаметром от 21 до 120 мм при ее контроле на соответствие требованиям ГН 2.3.3.1019-01 "Предельно допустимое количество миграции альдегидов (в том числе формальдегида) из оболочки искусственной белковой подобно "Белкозин".

Методика лабораторных исследований предназначается для органов и учреждений Государственного санитарно-эпидемиологического надзора Российской Федерации, научно-исследовательских институтов и предприятий, объединений и иных хозяйствующих субъектов, организаций и учреждений, независимо от их подчиненности и форм собственности, занимающихся производством, хранением и реализацией оболочек искусственных белковых на всей территории Российской Федерации и распространяется на все виды оболочек искусственных белковых независимо от стран-производителей или поставщика.

Свободными альдегидами в белковой оболочке называются альдегиды, экстрагируемые из оболочки в дистиллированную воду при температуре 80 °С и затем при температуре (20 - 25) °С.

Диапазон измерений массовой концентрации свободных альдегидов от 0,08 до 1,5 мг/куб. дм.

Продолжительность процедуры выполнения измерения с учетом обработки результатов - не более 90 мин.

Границы относительной погрешности результатов измерений (при Р = 0,95) дельта = +/- (26 - 10 х С)%, где С - массовая концентрация свободных альдегидов, мг/куб. дм.

Метод основан на измерении оптической плотности водного раствора окрашенного соединения 4-R-3,5-диацетил-дигидролутидинов, образующихся в реакции альдегидов с ацетилацетоноаммиачным реагентом.

Измерения выполняют в области спектра, близкой к максимуму поглощения на длине волны лямбда = (410 +/- 10) нм.

При подготовке и выполнении измерений применяют средства измерений и другие технические средства, приведенные в табл. 1.

При подготовке и в ходе выполнения измерений необходимо выполнять следующие условия:

- температура окружающей среды - от 15 до 30 °С;

- относительная влажность воздуха - от 40 до 95%;

- атмосферное давление - (84 - 106) кПа.

При подготовке к выполнению измерений должны быть выполнены перечисленные ниже операции.

Для уменьшения систематической составляющей погрешности следует выполнить калибровку мерной посуды, используемой для приготовления градуировочных растворов по ГОСТу 25794.1.

Собирают установку для отгонки альдегидов в соответствии с рисунком (Прилож. 1).

Парообразователь заполняют на 2/3 объема дистиллированной водой и нагревают ее до кипения.

Иономер и электроды готовят к измерению рН в соответствии с инструкцией по эксплуатации.

Необходимое число кювет заполняют до метки свежей дистиллированной водой. Выбирают одну из них в качестве кюветы сравнения. Выполняют измерения оптической плотности остальных кювет относительно кюветы сравнения.

Дистиллированную воду, используемую для приготовления градуировочных растворов, кипятят по ГОСТу 4517.

В сухом стакане вместимостью 250 куб. м взвешивают (75,0 +/- 0,1) г ацетата аммония. Соль в стакане растворяют в 200 куб. см свежей дистиллированной воды. Раствор из стакана фильтруют в мерную колбу вместимостью 500 куб. см; используя пипетку, вносят 1,5 куб. см ледяной уксусной кислоты и 1 куб. см свежеперегнанного ацетилацетона; объем раствора доводят до метки дистиллированной водой. Раствор тщательно перемешивают.

Хранят в холодильнике в посуде из темного стекла не свыше одного месяца. Не реже одного раза в неделю проверяют значение рН реагента, которое должно быть в пределах рН - 5,8 - 6,4. Если реагент не соответствует данному требованию, готовят свежий.

Градуировочную характеристику определяют в соответствии с Прилож. 2.

Испытуемый образец оболочки тщательно расправляют и вырезают 10 двойных высечек размерами (25 х 50) мм (общая односторонняя поверхность 250 кв. см).

Высечки помещают в стакан вместимостью 500 куб. см; закрывают воронкой и промывают проточной водой с температурой (10 - 25) °С при расходе (0,5 - 1,0) куб. дм/мин. в течение 20 мин. Затем воду из стакана сливают и промывают высечки дистиллированной водой - двумя порциями по 50 куб. см.

Подготовленные высечки сразу используют для выделения определяемого компонента.

При выполнении измерений должны быть последовательно выполнены перечисленные ниже операции, причем операции, начиная с п. 7.2 - дважды.

7.1.1. Подготовленные по п. 6.9 высечки переносят в коническую колбу вместимостью 500 куб. см. Наливают 500 куб. см дистиллированной воды с температурой (20 - 25) °С и закрывают колбу пробкой.

Колбу помещают в сушильный шкаф, нагретый до температуры (80 +/- 1) °С. Выдерживают в течение:

- для оболочек диаметром от 21 до 35 мм включительно - 30 мин.;

- для оболочек диаметром свыше 35 мм - 3 ч.

По окончании выдержки колбу помещают в водяную баню с температурой (10 - 25) °С на (15 - 20) мин.

После охлаждения колбу оставляют настаиваться. Продолжительность настаивания:

- для оболочек диаметром от 21 до 35 мм включительно - 4 ч;

- для оболочек диаметром свыше 35 мм - 24 ч.

7.1.2. Отгонку формальдегида из полученного экстракта выполняют сразу после проведения настаивания. Отбирают 200 куб. см экстракта, наливают его в круглодонную колбу вместимостью 500 куб. см, добавляют (25 +/- 0,5) г сульфата натрия, соединяют части подготовленной по п. 6.2 перегонной установки, и отгоняют со скоростью (4 - 6) куб. см/мин. в мерную колбу 100 куб. см дистиллята. В ходе отгонки равномерно подают в колбу пар, следя за тем, чтобы степень заполнения парообразователя водой была в пределах 1/3 - 2/3 объема.

Дистиллят тщательно перемешивают и используют для измерений массовой концентрации альдегидов.

Допускается хранить в холодильнике до 6 ч.

В коническую колбу вместимостью 100 куб. см вносят, используя пипетку, 15,0 куб. см дистиллята, полученного по п. 7.1, 10,0 куб. см ацетилацетоноаммиачного реагента и тщательно перемешивают.

Раствор N 2. В коническую колбу вместимостью 100 куб. см вносят 10,0 куб. см ацетилацетоноаммиачного реагента, 15,0 куб. см дистиллированной воды и тщательно перемешивают.

Раствор N 3. В коническую колбу вместимостью 100 куб. см вносят 15,0 куб. см дистиллята, полученного по п. 7.1, 10,0 куб. см дистиллированной воды и тщательно перемешивают.

Растворы N 2 и N 3 годны в течение одного рабочего дня.

Испытуемый раствор и раствор сравнения N 2 термостатируют при (50 +/- 1) °С в течение (20 + 1) мин. и охлаждают водой до комнатной температуры.

Испытуемый раствор и растворы сравнения N 2 и N 3 тщательно перемешивают и из колб наливают в пронумерованные рабочие кюветы номинальной длиной 50 мм.

В кювету сравнения наливают кипяченую дистиллированную воду, приготовленную по п. 6.5.

где:

В - угловой коэффициент градуировочной характеристики, куб. дм/мг (Прилож. 2, п. 2.2);

15 и 25 куб. см - объемы отбираемой аликвоты дистиллята и полученного из нее после добавления ацетилацетонового реагента раствора соответственно.

Массовую концентрацию альдегидов в белковой оболочке С (мг/куб. дм) в вытяжке рассчитывают по формуле:

где К - поправочный коэффициент (табл. 2), зависящий от диаметра оболочки.

За результат измерения массовой концентрации свободных альдегидов в белковой оболочке принимают среднее арифметическое двух параллельных определений при удовлетворительных результатах контроля сходимости по п. 10.1:

Результаты измерений массовой концентрации свободных альдегидов в белковой оболочке при записи в документах представляют в виде:

где:

С - среднее значение результатов двух параллельных определений, мг/куб. дм;

ДЕЛЬТА - абсолютная погрешность результата измерений

Первичные данные и полученные результаты измерений оформляют протоколами по форме, принятой в испытательной лаборатории, в виде самостоятельного документа или в сводном журнале (на бумаге или магнитном носителе).

Для контроля качества выполненной процедуры измерений используют расхождение между результатами параллельно выполненных определений для двух проб от одного дистиллята, полученного по п. 7.1. Измерения признают выполненными удовлетворительно, если абсолютное расхождение между ними не превышает значений, указанных в табл. 3. В противном случае оба измерения признают несостоятельными и выполняют повторные измерения, начиная с п. 7.2.

Если указанное условие не выполняется, проводят полную градуировку в соответствии с Прилож. 2.

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в 6 мес.

Данная операция не предусматривает контроль составляющих погрешности измерений, которые возникают при выполнении п. 7.1.1.

Контроль осуществляют методом добавок.

Выполняют измерения массовой концентрации альдегидов в пробах экстракта без добавки и с добавкой в соответствии с п. п. 7.2 - 8.

Результат признают удовлетворительным, если выполняется условие:

Если условие не выполняется, операцию повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

Контроль погрешности измерений проводят не реже 1 раза в 6 мес.

11.1. При выполнении анализов необходимо выполнять требования безопасности при работе с химическими реактивами.

В процессе анализа используются следующие пожароопасные и токсичные вещества.

Ацетилацетон. Подвижная прозрачная бесцветная жидкость со специфическим запахом. Плотность при 25 °С - 972 кг/куб. м. Ограниченно смешивается с водой. Температура кипения - 139 °С. Температура вспышки - 16,1 °С. Выполнять все работы и хранить на расстоянии не менее 0,7 м от источников тепла.

Уксусная кислота. Подвижная прозрачная бесцветная жидкость со специфическим резким запахом. Неограниченно смешивается с водой. Температура кипения - 118,1 °С. Температура вспышки - 38 °С. Сильно токсична: оказывает раздражающее и прижигающее действие на кожу и слизистые оболочки глаз и носа. ПДКсс - 0,015 мг/куб. м; класс опасности - II.

Все работы с указанными веществами выполнять в вытяжном шкафу, в очках и перчатках на расстоянии не менее 0,7 м от источников тепла.

При попадании на кожу и в глаза обильно промыть водой, затем 1%-ным раствором питьевой соды и вновь водой.

11.2. Электробезопасность при работе с электронагревательными и электроизмерительными приборами - по ГОСТу 12.1.019.

11.3. Организация обучения работающих правилам безопасного ведения работ - по ГОСТу 12.4.009.

11.4. Требования экологической безопасности. Отходы ацетилацетона и уксусной кислоты собирают и отправляют на уничтожение в установленном порядке.

К выполнению работ допускается лаборант со средним образованием, имеющий опыт работы, ознакомленный с настоящей методикой.

Для градуировки используют государственные стандартные образцы (ГСО 6263-91) раствора формальдегида массовой концентрацией (1,00 +/- 0,01) г/куб. дм.

В калиброванную чистую мерную колбу вместимостью 50 куб. см пипеткой вносят 5,0 куб. см стандартного раствора, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.

Массовая концентрация формальдегида в растворе А - 100 мг/куб. дм. Допускается хранить в холодильнике в посуде из темного стекла не более 1 мес.

В калиброванную чистую мерную колбу вместимостью 100 куб. см пипеткой вносят 5,0 куб. см раствора А, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.

Массовая концентрация формальдегида в растворе Б - 5,0 мг/куб. дм.

Раствор используют в день приготовления.

В пронумерованные мерные колбы вместимостью 25 куб. см вносят раствор Б в соответствии с таблицей, 10,0 куб. см ацетилацетоноаммиачного реагента, приготовленного по п. 6.7, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают. Погрешность приготовления градуировочных растворов не превышает 2%.

Параллельно готовят раствор сравнения N 2 в соответствии с п. 7.2.2.

Плотно закрытые колбы с градуировочными растворами и раствором сравнения N 2 термостатируют при (50 +/- 1) °С в течение (20 +/- 1) мин. и охлаждают водой до комнатной температуры.

Измерения оптической плотности приготовленных растворов выполняют не позднее 60 мин. после охлаждения.

Раствор формальдегида N j (j - номер градуировочного раствора, j - от 1 до 10) наливают в рабочую кювету фотоколориметра.

Одновременно в кювету сравнения наливают дистиллированную воду, приготовленную по п. 6.5.

Рекомендуемый масштаб построения графиков:

- по оси абсцисс - 20 мм/0,1 мг/куб. дм;

- по оси ординат - 20 мм/0,1 единицы оптической плотности.

Градуировочные характеристики для выполнения измерений по настоящей МВИ определяют в следующих случаях:

- при получении нового экземпляра прибора;

- после ремонта оптической схемы;

- при получении новых партий реактивов;

- в случаях, предусмотренных п. 10.2;

- в плановом порядке 1 раз в год.