"РД 52.24.512-2002. Руководящий документ. Методические указания. Методика выполнения измерений концентрации метана в водах парофазным газохроматографическим методом"
(утв. и введен в действие Росгидрометом 10.09.2002)

1. Разработан Гидрохимическим институтом.

2. Разработчики Ю.Я. Винников, канд. хим. наук (руководитель разработки), Н.С. Тамбиева.

3. Утвержден и введен в действие Заместителем Руководителя Росгидромета Цатуровым Ю.С. 10.09.02.

4. Одобрен ЦКПМ Росгидромета 03.07.02, протокол N 2.

5. Аттестат выдан Гидрохимическим институтом в 2001 г., N 512.

6. Зарегистрирован ЦКБ ГМП.

7. Разработан впервые.

Метан широко распространен в природе и является компонентом химического состава практически всех типов вод. В поверхностных водах суши метан имеет в основном биогенное происхождение и является конечным продуктом химического и биохимического разложения широкого круга органических соединений, поступающих в водоемы вследствие хозяйственной деятельности человека. Сведения о содержании метана используют для оценки состояния водного объекта.

Метанообразующие бактерии составляют большую и многообразную группу (несколько десятков видов) анаэробных бесспоровых организмов, имеющих общую способность продуцировать метан в процессе анаэробного дыхания. Метанообразование в основном происходит в донных отложениях. Но в хорошо прогретых слоях воды при высоком содержании органического вещества и дефиците кислорода метаногенез может идти и в поверхностных слоях воды, причем содержание метана в этом слое может быть выше, чем в придонном.

Важным свойством метанообразующих бактерий является возможность быстро восстанавливать свою активность при возобновлении питания. Поступление органических веществ в водный объект дает быстрый отклик на увеличение продукции метана. Оценка интенсивности образования метана может дать информацию о поступлении в водный объект веществ антропогенного происхождения.

В основном содержание метана в пресноводных объектах варьирует от долей до сотен куб. мм/куб. дм. ПДК на метан не установлена, ориентировочно-допустимый уровень (ОДУ) метана в водах соответствует 2,8 куб. см/куб. дм (2,0 мг/куб. дм). Такое содержание метана обнаружено в единичных случаях (чрезвычайная ситуация) в местах хронического загрязнения (поступление бытовых сточных вод, сточных вод жиро-комбината и др.). Однако для рыборазводных прудов установлено, что "жизненная область" для рыб не превышает 30 - 60 куб. мм/куб. дм, при 140 куб. мм/куб. дм наблюдается смерть отдельных рыб, при 250 - 500 куб. мм/куб. дм - массовая гибель рыбы. Смертность рыб коррелирует с заметно повышающимся содержанием метана в течение месяца, поэтому определение растворенного метана используют для ранней диагностики стрессового состояния водоема.

Метан является чутким показателем загрязненности водоема и его трофности. Для олиготрофных водоемов содержание метана незначительно: от долей до нескольких единиц куб. мм/куб. дм; в мезотрофных оно выше, а в евтрофных может достигать сотен куб. мм/куб. дм.

Многолетние наблюдения за поведением метана в природных водах и сопоставление его концентрации с содержанием основных загрязняющих веществ позволили дать оценку уровня загрязненности водного объекта (в целом или отдельных его участков) при различной трофности. Ориентировочная оценка представлена в таблице 1.

Методика была широко апробирована на различных водных объектах. Экспедиционные работы по апробации методики проводили при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований, проект N 00-15-98603.

Настоящий руководящий документ устанавливает газохроматографическую методику измерения содержания метана в пробах воды в диапазоне 0,2 - 600 куб. мм/куб. дм. Более высокое содержание метана может быть измерено при соответствующем уменьшении объема пробы воды.

Нормы погрешности для определения метана в воде не установлены.

Установленные для настоящей методики значения характеристик погрешности приведены в таблице 2.

При выполнении измерений в пробах воды с содержанием метана свыше 600 куб. мм/куб. дм погрешность измерения не превышает 20%.

Определение основано на выделении метана при 50 °С в равновесный пар над водой с последующим газохроматографическим анализом равновесного пара.

Идентификация метана осуществляется по времени удерживания. Количественное определение проводят методом внешнего стандарта, в качестве которого используют ацетон.

Газохроматографический анализ проб может выполняться либо в стационарной лаборатории, либо при наличии портативного хроматографа, в передвижной лаборатории непосредственно на водном объекте.

4.1.1. Хроматограф газовый типа Цвет-550 или другого типа, снабженный пламенно-ионизационным детектором и парофазным анализатором.

4.1.2. Микрошприц МШ-10М вместимостью 10 куб. мм, ТУ 2-833-106 - 1.

4.1.3. Микрошприц вместимостью 100 куб. мм фирмы "Hamilton" - 1.

4.1.4. Шприцы медицинские цельностеклянные, ТУ 61-1-378, вместимостью:

1 куб. см - 1

2 куб. см - 1

5 куб. см - 1.

4.1.5. Иглы инъекционные с мандренами по ОСТ 64-1-102 - 2.

4.1.6. Секундомер класса 1, ГОСТ 5072, - 1.

4.1.7. Термометры по ГОСТ 29224 с диапазоном 0 - 50 °С и ценой деления не более 0,5 °С - 2.

4.1.8. Шкаф сушильный с регулируемым нагревом любого типа - 1.

4.1.9. Микрокомпрессор аквариумный любого типа - 1.

4.1.10. Насос вакуумный ВН-494 или аналогичный - 1.

4.1.11. Жидкостной термостат любого типа с точностью термостатирования +/- 0,1 °С - 1.

4.1.12. Генератор водорода типа СГС-2, ТУ 6-091-1.550.004, или см. 4.2.8 - 1.

4.1.13. Колонка хроматографическая стеклянная с внутренним диаметром 3 мм и длиной 3 м - 1.

4.1.14. Цилиндры мерные, ГОСТ 1770, вместимостью 50 куб. см - 1.

4.1.15. Флаконы с навинчивающимися пластмассовыми пробками, ТУ 64-2-109, номинальной вместимостью:

30 куб. см - 110

10 куб. см - 50.

4.1.16. Капельница с колпачком, ГОСТ 25336, вместимостью 25 куб. см - 1.

4.1.17. Склянка для очистки газов, СТП, ГОСТ 25336 - 1.

4.1.18. Кристаллизатор, ГОСТ 25336, - 1.

Допускается использование других типов средств измерений, посуды и вспомогательного оборудования, в том числе импортных, с характеристиками не хуже, чем у приведенных в 4.1.

4.2.1. Метан газообразный в баллоне, ГОСТ 3022.

4.2.2. Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603, или ос.ч., ТУ 6-09-3513.

4.2.3. Хроматон N-AW или Хромосорб W-AW (фракция 0,25 - 0,31 мм или 0,20 - 0,25 мм) с 10% нанесенной неподвижной фазы FFAP.

4.2.4. Хлорид ртути (II) (сулема), ч.д.а., ГОСТ 4519.

4.2.5. Кислота серная, концентрированная, х.ч., ГОСТ 4204-77.

4.2.6. Дистиллированная вода, ГОСТ 6709.

4.2.7. Азот газообразный в баллоне, ос.ч., МРТУ 6-02-375, или азот нулевой поверочный, ТУ 6-21-39.

4.2.8. Водород газообразный в баллоне, ГОСТ 3022, или см. 4.1.12.

4.2.9. Уголь активный БАУ, ГОСТ 6217.

4.2.10. Стеклоткань, ГОСТ 10146, промытая ацетоном.

4.2.11. Фторопластовая пленка (лента) Ф-4ЭО толщиной 0,04 - 0,08 мм, ГОСТ 24222.

4.2.12. Резина силиконовая толщиной 3 мм.

Допускается использование реактивов и материалов, изготовленных по другой нормативно-технической документации, в том числе импортных, с квалификацией не ниже указанной в 4.2.

Поскольку метан является легколетучим компонентом, для уменьшения потерь отбор проб на водоеме производят непосредственно во флаконы, в которых будет проводиться парофазный анализ.

Отбор придонных проб воды производят батометром с резиновым шлангом. При заполнении флакона водой шланг должен касаться его дна. Флаконы заполняют до метки, оставляя 5 куб. см газовой фазы, добавляют 3 капли консерванта и немедленно герметично закрывают.

При отборе придонных проб воды необходимо, чтобы расстояние между батометром и дном водоема было не менее 0,5 м, в противном случае возможен захват метана из ила.

Из поверхностного слоя пробу отбирают погружением флакона в воду с борта лодки, мостков либо из эмалированного ведра сразу же после его поднятия на борт судна.

В качестве консерванта используют раствор серной кислоты (6.1.2) либо раствор хлорида ртути (6.1.3). Законсервированные пробы воды могут храниться в течение 20 дней при температуре 4 °С и в течение 15 дней при температуре не выше 25 °С. Хранение и транспортирование флаконов с пробами осуществляется в перевернутом положении.

6.1.1. Вода, не содержащая метана

Дистиллированную воду кипятят 30 мин. и дают остыть. Хранят в колбе с хорошо притертой пробкой не более суток.

6.1.2. Раствор серной кислоты 1:1

К 10 куб. см дистиллированной воды добавляют 10 куб. см концентрированной серной кислоты.

6.1.3. Раствор хлорида ртути (II) 3%

В 100 куб. см дистиллированной воды растворяют 3 г хлорида ртути (II).

В качестве сосудов для парофазного анализа используют стандартные стеклянные (аптечные) флаконы с номинальной вместимостью 30 куб. см (полная вместимость 42 - 44 куб. см) с навинчивающимися пластмассовыми крышками и резиновыми вкладышами. Для отбора паровой фазы в крышке флакона просверливают отверстие диаметром 1,5 - 2,0 мм для ввода иглы шприца. Герметизацию флакона осуществляют с помощью резинового вкладыша, у которого срезают выступающую часть. Уплотнение осуществляют гладкой стороной вкладыша. Резину от контакта с пробой защищают прокладкой, вырезанной из фторопластовой пленки. Для герметизации можно использовать и силиконовую резину (4.2.11). Фторопластовую прокладку заменяют после каждого определения.

Для определения метана в пробах воды с содержанием свыше 600 куб. мм/куб. дм используют флаконы вместимостью 10 куб. см (полная вместимость 12 - 14 куб. см).

Для каждой серии определений подбирают флаконы с вместимостью, отличающейся не более чем на 0,5 куб. см. Для этого флаконы полностью заполняют водой при комнатной температуре (если вода образует выпуклый мениск, излишек снимают стеклянной палочкой) и измеряют с помощью цилиндра объем воды, который равен полной вместимости флакона.

В парофазном анализе важным является обеспечение одинакового соотношения объемов жидкой и газовой фазы во флаконах с пробами. Для калибровки флакон заполняют водой доверху, отбирают медицинским шприцем 5 куб. см воды и отмечают уровень, до которого должны быть заполнены флаконы при отборе проб.

Отбор и ввод в хроматограф паровой фазы осуществляют с помощью устройства для парофазного анализа при наличии его в комплекте хроматографа. При отсутствии такого устройства пробу равновесного пара отбирают и вводят шприцем вместимостью 2 куб. см (4.1.4).

Подготовку устройства для парофазного анализа или газового шприца осуществляют в соответствии с инструкцией по их эксплуатации. Медицинский шприц непосредственно перед отбором паровой фазы подогревают, наполняя его несколько раз дистиллированной водой с температурой не ниже 50 °С. Внутренняя поверхность шприца должна быть влажной, однако присутствие в шприце капель воды недопустимо.

6.4.1. Приготовление основного стандартного раствора метана

В качестве основного стандартного раствора используют насыщенный при определенной температуре раствор метана в воде. Растворимость метана (куб. мм/куб. см) равна: 39,7; 36,7; 34,0 и 31,6 при температуре 15; 20; 25 и 30 °С соответственно.

Для приготовления основного стандартного раствора флаконы для парофазного анализа заполняют доверху водой, не содержащей метана (6.1.1), и переворачивают вверх дном в заполненном водой кристаллизаторе (4.1.18). Во флаконы с помощью трубки, присоединенной к баллону с метаном, отбирают 15 - 20 куб. см метана и под водой завинчивают крышку. Приготовленные таким образом растворы можно хранить в перевернутом состоянии в холодильнике до месяца.

Перед использованием для установления равновесия флаконы встряхивают в течение 3 - 5 мин., укрепляют вверх дном в штативе и выдерживают не менее 8 ч в месте, защищенном от сквозняков и прямого солнечного света. Эту процедуру удобно проводить в конце рабочего дня, оставляя флаконы на ночь. Перед окончанием выдерживания фиксируют окружающую температуру.

Основному стандартному раствору приписывают массовую концентрацию метана, равную:

39,7 куб. мм/куб. дм при 15 °С;

36,7 куб. мм/куб. дм при 20 °С;

34,0 куб. мм/куб. дм при 25 °С;

1,6 куб. мм/куб. дм при 30 °С.

Если вода насыщается метаном при промежуточных температурах, концентрацию его определяют интерполяцией. Основной стандартный раствор используют только один раз.

6.4.2. Приготовление градуировочных образцов

Градуировочные образцы готовят из основного стандартного раствора метана (6.4.1). Для этого 6 флаконов для парофазного анализа заполняют водой, не содержащей метана, оставляя 5 куб. см газовой фазы, и герметично закрывают. Микрошприцем вместимостью 100 куб. мм или шприцем вместимостью 1 куб. см отбирают из флакона 10; 30; 90; 150 и 300 куб. мм основного стандартного раствора метана и через прокладку в крышке вводят в подготовленные флаконы. В 6 других флаконов шприцем вместимостью 10 куб. мм вводят соответственно 0,34; 1,0; 2,0; 3,0; 5,1 и 10,2 куб. мм ацетона. Ацетон вводят не через крышку флакона, а непосредственно в воду, а затем герметично закрывают.

Содержание метана в приготовленных образцах в куб. мм рассчитывают, исходя из концентрации и объема основного стандартного раствора, взятого для приготовления данного образца. Например, при концентрации метана в основном стандартном растворе 34,0 куб. мм/куб. см содержание метана в градуировочных образцах соответственно равно 0,34; 1,02; 2,04; 3,06; 5,10 и 10,2 куб. мм.

Градуировочные образцы должны использоваться сразу после приготовления и хранению не подлежат.

6.4.3. Подготовка хроматографической колонки

Стеклянную хроматографическую колонку внутренним диаметром 3 мм и длиной 3 м промывают ацетоном, сушат при температуре 100 - 110 °С в сушильном шкафу и заполняют носителем с неподвижной фазой (4.2.3). Для заполнения хроматографической колонки один ее конец, который в дальнейшем будет подсоединяться к детектору, закрывают тампоном из промытого ацетоном волокна из стеклоткани (4.2.10) и присоединяют к вакуумному насосу (4.1.10) через мелкую капроновую сетку. Затем включают насос и заполняют колонку носителем с фазой, добавляя последний небольшими порциями и постукивая колонку палочкой с резиновым концом при постоянно работающем насосе, следя за тем, чтобы носитель заполнял колонку равномерно, без разрывов.

Заполненную колонку закрывают тампоном из стекловолокна и помещают в термостат колонок хроматографа, подсоединив к испарителю, но не подсоединяя к детектору. Кондиционирование колонки целесообразно проводить следующим образом. Установив расход азота через колонку 35 - 45 куб. см/мин., выдерживают колонку при температуре 50 - 60 °С в течение 20 - 30 мин. Затем поднимают температуру термостата колонок со скоростью 2 - 3 град./мин. до 180 °С и при этой температуре кондиционируют колонку в течение 8 - 10 ч.

Во время кондиционирования рекомендуется 3 - 4 раза ввести в колонку равновесный с дистиллированной водой пар. Для этого во флаконы для парофазного анализа помещают дистиллированную воду, оставляя 5 куб. см газовой фазы, подогревают в термостате при 50 °С в течение 25 мин. и вводят в хроматографическую колонку.

Подготовку хроматографа проводят в соответствии с инструкцией по его эксплуатации. После кондиционирования колонки ее подсоединяют к детектору и устанавливают условия хроматографирования:

- расход азота через колонку 30 куб. см/мин.;

- расход водорода 30 куб. см/мин.;

- расход воздуха 300 куб. см /мин.;

- температура испарителя 130 °С;

- температура термостата колонок 70 - 90 °С;

- скорость диаграммной ленты 600 мм/ч.

Для установления коэффициента пересчета концентрации ацетона в равновесном паре на концентрацию метана используют градуировочные образцы (6.4.2). Задают условия и выполняют парофазный анализ серии градуировочных образцов в соответствии с 7. Для каждого из растворов выполняют два параллельных определения, для этого заполняют одновременно по 2 флакона. Измеряют высоты хроматографических пиков метана и ацетона, принимая за результат среднее из двух параллельных измерений.

Коэффициент пересчета K, учитывающий особенности распределения метана и ацетона в системе вода - равновесный пар, характеристики парофазного анализатора, хроматографической колонки и т.п., рассчитывают по формуле:

Коэффициент K устанавливают при замене газохроматографической колонки или изменении чувствительности регистратора хроматографа, но не реже 1 раза в год.

Флаконы с пробой помещают в термостат при температуре 50 °С и выдерживают 25 мин. для установления равновесия. В течение этого времени флаконы несколько раз энергично встряхивают. По установлении равновесия осуществляют отбор и ввод 2 куб. см равновесного пара с помощью устройства для парофазного анализа и записывают хроматограмму.

При отсутствии парофазного анализатора пробу равновесного пара вводят с помощью газового или медицинского шприца вместимостью 2 куб. см. Шприц предварительно продувают азотом, отбирая его из испарителя хроматографа и сбрасывая в атмосферу. Затем отбирают 2 куб. см азота, прокалывают иглой шприца прокладку флакона с пробой и 3 - 5 раз прокачивают этот объем газа туда и обратно. При последнем прокачивании устанавливают поршень на отметке 2 куб. см, вынимают иглу, вводят в испаритель хроматографа и записывают хроматограмму.

Стандарт хроматографируют на той же шкале, что и пробу, причем пики стандарта и пробы должны быть соизмеримы.

Для расчета концентрации метана используют высоту его хроматографического пика. Расчет проводят по формуле:

где ДЕЛЬТА - характеристика погрешности измерения для данной концентрации метана (таблица 2).

Численные значения результата измерения должны оканчиваться цифрой того же разряда, что и значения характеристики погрешности.

Оперативный контроль погрешности проводят по воспроизводимости результатов измерения содержания метана в повторных рабочих пробах. Периодичность контроля - не менее одной контрольной на 15 - 20 рабочих проб за период, в течение которого условия проведения анализа неизменны.

Образцами для контроля являются рабочие пробы воды, отобранные в соответствии с разделом 5.

При превышении норматива повторяют определение с использованием второй контрольной пробы. При повторном превышении норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

10.1. При выполнении определений концентрации метана в пробах воды соблюдают требования безопасности, установленные в "Правилах по технике безопасности при производстве наблюдений и работ на сети Госкомгидромета", Л., Гидрометеоиздат, 1983.

10.2. По степени воздействия на организм вредные вещества, используемые при выполнении определений, относятся к 1 и 2 классам опасности по ГОСТ 12.1.007.

10.3. Содержание используемых вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать установленных предельно допустимых концентраций в соответствии с ГОСТ 12.1.005.

К выполнению определений и обработке их результатов допускаются лица с высшим профессиональным образованием, имеющие опыт работы с газовой хроматографией и освоившие методику анализа.

На подготовительные работы требуется:

- приготовление хроматографической насадки - 8 чел.-ч;

- подготовка и калибрование 10 флаконов для отбора и анализа проб - 5 чел.-ч;

- установление градуировочного коэффициента - 7 чел.-ч.

Для проведения анализа серии из 10 проб требуется 8 чел.-ч.

Для проведения анализа единичной пробы - 1,8 чел.-ч.

Затраты времени на подготовку посуды включены в затраты времени на проведение анализа.