"МУК 4.1.1352-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций 3-[3-(4-бром-1,1-бифенил-4-ил)-3-гидрокси-1-фенилпропил]-4-гидрокси-2Н-1-бензопиран-2-он (бромадиалона) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны. Методические указания"
(утв. Минздравом России 16.05.2003)

1. Методические указания подготовлены: Научно-исследовательским институтом медицины труда РАМН, в составе Л.Г. Макеева (руководитель), Г.В. Муравьева, Е.М. Малинина, Е.Н. Грицун, Г.Ф. Громова, при участии А.И. Кучеренко (Департамент госсанэпиднадзора Минздрава России).

2. Рекомендованы к утверждению на совместном заседании группы Главного эксперта Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию по проблеме "Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение" и методбюро п/секции "Промышленно-санитарная химия" Проблемной комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии".

3. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Министерстве здравоохранения Российской Федерации.

4. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения РФ Г.Г. Онищенко 16 мая 2003 года.

5. Введены впервые.

Сборник методических указаний "Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны" (Вып. 41) разработан с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) и является обязательным при осуществлении санитарного контроля.

Включенные в данный сборник 19 методик контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТ Р 8.563-96 "Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений", МИ 2335-95 "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа", МИ 2336-95 "Характеристики погрешности результатов количественного химического анализа. Алгоритмы оценивания".

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в гигиенических нормативах - ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны", дополнениях 2, 3, 4, 6 к ним и дополнениях 2, 3, 4 и 5 к ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для центров госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных министерств и ведомств.

Настоящие методические указания устанавливают количественный анализ воздуха рабочей зоны на содержание бромадиалона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в диапазоне концентраций 0,0005 - 0,005 мг/куб. м.

2.1. Структурная формула (не приводится).

2.3. Молекулярная масса 527,44.

2.4. Регистрационный номер CAS 28772-56-7.

2.5. Физико-химические свойства.

Бромадиалон - белое кристаллическое вещество, температура плавления 200 - 210 °С, не растворим в воде, эфире, гексане, хорошо растворим в ацетоне, хлороформе, этаноле.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика.

Бромадиалон является антикоагулянтом (нарушает свертываемость крови, повышает проницаемость сосудов).

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) бромадиалона в воздухе рабочей зоны - 0,001 мг/куб. м.

Методика обеспечивает выполнение измерений бромадиалона с погрешностью, не превышающей +/- 17% при доверительной вероятности 0,95.

Измерение массовой концентрации бромадиалона выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием при длине волны 280 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания бромадиалона в анализируемом объеме пробы - 0,01 мкг.

Нижний предел измерения концентрации бромадиалона в воздухе 0,0005 мг/куб. м (при отборе 240 куб. дм воздуха).

Измерению не мешают сопутствующие вещества: дифенацин, хлорфасинон.

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы:

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

5.2. Реактивы

Допускается использование других средств измерения, вспомогательного оборудования, материалов и реактивов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже утвержденных в разделе.

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.

6.3. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим и средним специальным образованием, прошедшие обучение работе на жидкостном хроматографе.

8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, атмосферном давлении 84,0 - 106,6 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку жидкостного хроматографа, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор бромадиалона в хлороформе с концентрацией 1 мг/куб. см готовят растворением 26,3 мг бромадиалона (с учетом процентного содержания основного вещества) в мерной колбе вместимостью 25 куб. см. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.2. Стандартный раствор N 1 с концентрацией 40 мкг/куб. см готовят разведением 1,0 куб. см основного стандартного раствора хлороформом в мерной колбе, вместимостью 25 куб. см. Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение недели.

9.1.3. Градуировочные растворы с концентрацией бромадиалона от 0,4 мкг/куб. см до 4,0 мкг/куб. см готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 хлороформом. Растворы устойчивы при хранении в холодильнике в течение недели.

9.1.4. Состав элюента: А-ацетонитрил:метанол = 1:1 + 0,5% (по объему) ортофосфорной кислоты.

Градиент В-ортофосфорной кислоты 0,2%-ный (по объему) готовят следующим образом: к 98,8 куб. см бидистиллированной воды приливают 0,2 куб. см ортофосфорной кислоты.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку жидкостного хроматографа проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Количественный анализ бромадиалона проводят методом абсолютной градуировки. Для этого вводят в хроматограф по 25 куб. мм каждого градуировочного раствора.

Градуировочный график строят в координатах: количество введенного бромадиалона (мкг) - площадь пиков (условные единицы). Градуировку выполняют не менее чем по 6 точкам, проводя 5 параллельных измерений для каждой концентрации, согласно табл. 1.

Проверку градуировочного графика проводят не реже 1 раза в месяц и при изменении условий анализа.

9.4. Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 20 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель. Для измерения 1/2 ОБУВ бромадиалона необходимо отобрать 240 куб. дм воздуха. Отобранные пробы могут храниться в течение месяца в пробирках с притертыми пробками.

Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан вместимостью 25 куб. см и дважды экстрагируют хлороформом по 5 куб. см. Экстракты объединяют и переносят в остродонную колбу и упаривают на ротационном испарителе досуха при температуре не выше 50 °С. Степень десорбции бромадиалона с фильтра 97%. Сухой остаток растворяют в 0,3 куб. см хлороформа. Хроматографический анализ проб выполняют в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов.

Количественное содержание бромадиалона в хроматографируемом объеме (мкг) определяют по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрацию бромадиалона в воздухе (С, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

а - содержание бромадиалона в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем раствора пробы, куб. мм;

б - объем раствора пробы, взятой для анализа, куб. мм;

V - объем воздуха, отобранного для анализа (куб. дм) и приведенного к стандартным условиям (Прилож. 1).

Результат количественного анализа представляют в виде:

С +/- ДЕЛЬТА мг/куб. м, Р = 0,95, значение ДЕЛЬТА = 0,000023 + 0,13С мг/куб. м,

где:

ДЕЛЬТА - характеристика погрешности;

С - значение массовой концентрации анализируемого компонента в пробе.

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2.

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе С.

13.1. Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике.

13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D, выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 1 ч 30 мин.

Методические указания разработаны: НИИ медицины труда РАМН (Е.Н. Грицун, А.В. Кудряшов); НПЦ "Родемос" (В.С. Лапко).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (Т 20 °С и давление 101,33 кПа) проводят по формуле: